感染過程中鉤端螺旋體外膜蛋白抗原表達(dá)水平變化及其調(diào)控機(jī)制.pdf

1、目的:了解感染人巨噬細(xì)胞過程中問號(hào)鉤端螺旋體（簡(jiǎn)稱鉤體）黃疸出血群賴型賴株主要外膜蛋白(OMP)抗原表達(dá)水平變化及其OmpR相關(guān)基因調(diào)控機(jī)制。
　　方法:采用生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)測(cè)問號(hào)鉤體賴株OmpR及其組氨酸激酶(HK)基因和結(jié)構(gòu)功能域。采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)鉤體感染人THP-1巨噬細(xì)胞前后鉤體主要OMP編碼基因mRNA水平的變化。采用HK胞外區(qū)多肽抗血清封閉試驗(yàn)及氯氰碘柳胺阻斷試驗(yàn)，檢測(cè)OmpR及其HK對(duì)感染過程中問號(hào)鉤

2、體OMP編碼基因mRNA水平變化的影響。
　　結(jié)果:生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示，LB015和LB333可能是問號(hào)鉤體賴株OmpR編碼基因，LB014可能是其HK編碼基因。問號(hào)鉤體賴株感染THP-1細(xì)胞后，lipL21、lipL32、lipL41基因mRNA水平迅速并持續(xù)下降(P＜0.01)，groEL、mce、loa22、ligB基因mRNA水平瞬時(shí)迅速升高(P＜0.01)。氯氰碘柳胺或HK抗血清處理可使感染THP-1細(xì)胞而顯著下降的