乳酸片球菌素抑菌機理研究.pdf

1、乳酸片球菌素是由乳酸片球菌通過核糖體合成機制產(chǎn)生的具有抗菌活性的蛋白質，對單核細胞增多癥李氏桿菌，植物乳桿菌等多種革蘭氏陽性菌具有明顯的抑制作用。本實驗從乳酸片球菌素的二級結構，吸附特性，以及作用模式三方面探索了其抑菌的機制。
　　 通過圓二色光譜法和蛋白質二級結構預測與模擬研究，發(fā)現(xiàn)乳酸片球菌素的α-螺旋含量約為6.8％，β-折疊含量約為20％，轉角所占比例為20％。當乳酸片球菌素的α-螺旋含量增加，β-折疊，轉角含量降低時，

2、細菌素活性隨之降低，在pH6.0的低鹽溶液中，乳酸片球菌素的結構穩(wěn)定，此時抑菌活性最高；在pH12.0或者高濃度的鹽溶液中，乳酸片球菌素α-螺旋含量增加至58％，β-折疊結構消失，細菌素活性喪失。乳酸片球菌素中的二硫鍵對維持細菌素的活性和穩(wěn)定性有著至關重要的作用。
　　 以單核細胞增多癥李氏桿菌CVCC1595為指示菌，通過對乳酸片球菌素吸附率的研究，發(fā)現(xiàn)乳酸片球菌素的吸附受鹽濃度、pH和細胞膜的成分影響顯著。NaCI和磷酸鹽濃

3、度越高，吸附作用越小，在400 mmol/L NaCI溶液中，乳酸片球菌素對菌體的吸附率為0；在pH6.0吸附率最高(100％)，pH2.0和8.0的吸附率為24.4％，pH12.0時乳酸片球菌素在菌體上無吸附。溫度對吸附影響很小，在100℃時吸附率比室溫時下降了1.56％；時間對吸附?jīng)]有影響。
　　 以108 cfu/ml的單核細胞增多癥李氏桿菌CVCC1595和植物乳桿菌CICC6043為指示菌，分別與不同量的乳酸片球菌素作

4、用不同時間后，發(fā)現(xiàn)乳酸片球菌素造成指示菌胞內紫外吸收物質的溶出，溶出物不與細菌素作用量和作用時間成正相關。
　　 乳酸片球菌素造成敏感菌胞內ATP的泄漏，同時還導致質子動力勢(ProtonMotive Force)的耗散，PMF的喪失導致細胞不能合成能量物質，細胞由于能量衰竭而死。
　　 乳酸片球菌素的作用靶點是細胞膜，首先由靜電引力而吸附于膜上，然后由于疏水相互作用而插入細胞膜，最后在細胞膜上形成孔洞，使胞內物質溶出，