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文檔簡介
1、研究目的: 1.探討膳食因素與兒童哮喘之間的關(guān)系。 2.了解哮喘患者機體血清SOD、MDA、GSH—Px、T—AOC的水平,并探討機體中VitA、VitC、VitE水平與哮喘的關(guān)系。 3.了解兒童ADAM33基因位點多態(tài)性與兒童哮喘發(fā)病之間的關(guān)系。 研究對象和方法: 1、研究對象 把從花都、白云和海珠三個區(qū)8個小學(xué)7635名兒童中篩選出有醫(yī)生確診為哮喘的兒童納入病例組。把無既往哮喘診斷史,
2、無喘息,無伴有呼吸短促的喘息,無伴有睡眠阻礙的喘息,無運動性喘息和夜間咳嗽的兒童納入健康對照組。檢測血抗氧化水平還要求是非吸煙者,未長期持續(xù)服用抗氧化補充劑、抗氧化維生素采血前未服用抗炎藥物,調(diào)查前兩周內(nèi)無呼吸道感染及肺部疾病,調(diào)查前四周無哮喘急性加重癥狀,空腹采血。 2、研究方法 2.1問卷調(diào)查 本研究采用國際標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查問卷,調(diào)查內(nèi)容包括兒童本人有無哮喘診斷史,父母哮喘診斷史,父母過敏診斷史,過敏性氣管炎診斷史,
3、支氣管炎診斷史,細(xì)支氣管診斷史,肺炎診斷史,其他呼吸系統(tǒng)疾病診斷史,有無被動吸煙,該兒童有無呼吸系統(tǒng)癥狀,有何呼吸系統(tǒng)癥狀,膳食攝入情況。分家長問卷和學(xué)生問卷。本研究主要采用家長問卷信息。 2.2膳食回顧調(diào)查 采用稱重法和24小時膳食記錄調(diào)查結(jié)合的方法,獲取研究對象三天的膳食情況。要求寫出一天三餐進(jìn)餐時間及加餐時間,寫出食用食物名稱,烹調(diào)方法和攝入量。 2.3體格測量 按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行體格測量,指標(biāo)包括身高
4、、體重等,并計算體質(zhì)指數(shù)(Body Mass Index,BMI)。 2.4血脂 空腹采血,清除法測定。 2.5抗氧化維生素水平檢測 用高效液相色譜法測定血漿中VitA、VitC、VitE水平。 2.6氧化/抗氧化狀態(tài)的檢測 按試劑盒說明方法測定血清中SOD、MDA、T—AOC、GSH—Px。 2.7 ADAM33基因多態(tài)性檢測 提取研究對象的全血基因組DNA,用聚合酶鏈反
5、應(yīng).限制性片斷長度多態(tài)性分析方法(PCR—RFLP)測定ADAM33基因多態(tài)性,然后隨意選取擴(kuò)增后的樣品送上海英駿生物科技有限公司進(jìn)行序列檢測。 2.8統(tǒng)計分析 2.8.1建立數(shù)據(jù)庫 調(diào)查問卷用Epidate軟件輸入。膳食記錄用營養(yǎng)計算器V1.6建立數(shù)據(jù)庫。 2.8.2膳食資料的處理 數(shù)據(jù)庫的膳食資料導(dǎo)出為Excel表格,算出三大營養(yǎng)素供能比。 2.8.3用SPSS11.5統(tǒng)計分析
6、 用Microsoft Excel2000建立數(shù)據(jù)庫,采用SPSS11.5軟件進(jìn)行分析,檢驗水準(zhǔn)=0.05,組間比較采用方差分析和t檢驗。血液生化指標(biāo)之間關(guān)系用多元相關(guān)分析。父母、自身因素與兒童哮喘的關(guān)聯(lián)強度用OR描述,血清中維生素水平與哮喘癥狀的關(guān)聯(lián)用OR描述,以單因素和多因素Logistic回歸模型分別計算粗OR和校正OR值及其95%可信區(qū)間。Hardy—Weinberg平衡吻合度檢驗,ADAM33基因頻率,等位基因頻率用SHEsi
7、s網(wǎng)上軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果: 1.研究對象的基本情況 本次調(diào)查共篩查出哮喘兒童106名(其中45人為現(xiàn)患哮喘,61人為既往哮喘),有95名兒童經(jīng)家長同意參加調(diào)查,其中84人參加體檢和抽血。對照組106名兒童中,99名兒童經(jīng)父母同意參加調(diào)查,其中89人參加體檢和抽血。病例組和對照組年齡、性別、身高、體重、BMI無顯著性差異。 2.父母因素與哮喘的關(guān)系 父母哮喘患病史與兒童哮喘發(fā)病之間無關(guān)聯(lián)。父母過敏
8、史與兒童哮喘發(fā)病有顯著關(guān)聯(lián)其粗OR值分別為6.04(95%CI:2.14-17.08)和7.59(95%CI:2.13-27.03)。在校JT混雜因素后是4.42(95%CI:1.28-15.29)和4.48(95%CI:1.10-18.22),仍然有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.兒童自身因素與哮喘的關(guān)系 顯示兒童自身因素與哮喘的關(guān)系。兒童過敏史與哮喘之間呈顯著關(guān)聯(lián)(粗OR=9.59,95%CI:3.72-24.74;校正OR=6.
9、82,95%CI:2.11-22.03)。低出生體重、早產(chǎn)和未母乳喂養(yǎng)的兒童發(fā)生哮喘的風(fēng)險與其對照組未見顯著性差異。 4.血脂的比較 既往病例的血漿LDL—C水平低于對照組,現(xiàn)患病例的LDL—C水平高于對照組,但是差別無統(tǒng)計學(xué)意義。病例組TC水平高于對照組,但是差別無統(tǒng)計學(xué)意義。但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 5.血漿抗氧化維生素水平與哮喘的關(guān)系 哮喘兒童血漿中VitA、VitC、VitE的水平低于
10、健康兒童,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 6.體內(nèi)氧化/抗氧化狀態(tài)與哮喘的關(guān)系 病例與對照SOD、MDA、T—AOC水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),病例組中GSH—Px高于對照組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 各生化指標(biāo)之間關(guān)系 對照組中VitA與GSH—Px活力正相關(guān)(r=0.272,P<0.05),VitC與MDA負(fù)相關(guān)(r=—0.281,P<0.05),SOD與GSH—Px活力正
11、相關(guān)(r—0.329,P<0.01),LDL—C與SOD正相關(guān)(F0.275,P<0.05),SOD與MDA存在負(fù)相關(guān)(r=—0.305,P<0.05),MDA與T—AOC負(fù)相關(guān)(r=—0.294,P<0.05),GSH—Px與TC正相關(guān)(r=0.268,P<0.05)。病例組中MDA與SOD負(fù)相關(guān)(r=—0.311,P<0.05),GSH—Px與T—AOC正相關(guān)(r=0.274,P<0.05)。 8.各生化指標(biāo)與喘息、氣促之間
12、關(guān)系 單因素Logistic回歸分析,發(fā)現(xiàn)VitA、VitC、VitE與喘息癥狀有負(fù)關(guān)聯(lián),OR值分別為0.003(95%CI:0.00-0.03),0.80(95%CI:0.73-0.88),0.80(95%CI:0.66-0.96),TC與喘息癥狀有正關(guān)聯(lián)OR值為1.51(95%CI:1.02-2.25),校正了性別、年齡、BMI、父母哮喘史、父母過敏史、兒童過敏史、早產(chǎn)、低出生體重、母乳喂養(yǎng)和被動吸煙等因素的多因素Logis
13、tic回歸分析結(jié)果顯示VitA、VitC、VitE與喘息癥狀仍有負(fù)關(guān)聯(lián),OR值分別為0.00(95%CI:0.00-0.03),0.73(95%CI:0.63-0.86)0.64(95%CI:0.48-0.87),LDL—C與喘息癥狀有負(fù)關(guān)聯(lián)OR值為0.16(95%CI:0.03-0.80)。各生化指標(biāo)與氣促沒有明顯關(guān)聯(lián)。 9.膳食資料 膳食調(diào)查結(jié)果顯示膳食能量、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)供能比、碳水化合物、碳水化合物供能比、膳食纖
14、維、膽固醇、VitA、VitC、VitE的攝入兩組比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義。病例組脂肪攝入高于對照組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。病例組脂肪供能比高于對照組,差別近乎顯著(P=0.053)。 10.ADAM33基因多態(tài)性與哮喘的關(guān)系 受調(diào)查兒童中,T1位點三種基因型在病例組分布頻率為TT是88.5%,TC是10.3%,CC是1.1%。在對照組分布頻率為TT是75.7%,TC是21.6%,CC是2.7%。等位基因C在對照
15、組和健康對照組分布頻率分別是6.3%,13.5%。V4位點三種基因型在病例組分布頻率分別是33.0%,48.9%,18.2%,在健康對照組分布頻率是32.0%,45.3%,22.7%。等位基因C在病例組和健康對照組的分布頻率分別是42.6%,45.3%。ADAM33基因的T1位點和V4位點檢測結(jié)果進(jìn)行Hardy—Weinberg平衡吻合度檢驗,顯示基因型分布符合遺傳平衡規(guī)律。T1位點和V4位點病例組和對照組比較基因頻率和基因型頻率差別無
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