不同價態(tài)砷對大鼠砷代謝及甲基化生化指標的影響.pdf

1、目的：觀察不同價態(tài)、不同劑量砷染毒大鼠代謝相關生化指標的活力及大鼠肝臟中甲基轉移酶mRNA的表達情況，尋找不同價態(tài)砷體內代謝間的差異，為進一步探討砷的毒作用機制提供依據(jù)。
　　 方法：選用Wistar 大鼠70 只，隨機分為對照組，對照組給予飲用去離子水，iAs3+高、中、低劑量組，分別給予20.0、6.7、2.2mg/kg的亞砷酸鈉溶液，iAs5+高、中、低劑量組，分別給予20.0、6.7、2.2mg/kg的砷酸氫鈉溶液，共7

2、 組。采用自由飲水法染毒，連續(xù)染毒90 d。大鼠飼養(yǎng)至第3個月末，用頸椎脫臼法處死。應用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測各組肝臟勻漿液中SAM，ARR，MTR的活力；酶聯(lián)免疫吸附法測定血細胞中PK 活力；實時熒光定量PCR 測定各組肝臟基因組中甲基轉移酶mRNA的表達。
　　 結果：1.iAs3+和iAs5+均可升高大鼠肝臟中SAM 活力(P<0.05)，且隨著染砷劑量的增加，呈下降的趨勢，相同劑量iAs3+組SAM活力低于iAs

3、5+組，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；2.iAs3+和iAs5+可改變大鼠肝臟中的ARR 活力，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；iAs3+高、中劑量組與低劑量組比較，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，iAs5+高劑量組與低劑量組比較，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；iAs3+和iAs5+各劑量組間比較，差別均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；3.MTR 可改變iAs3+和iAs5+大鼠肝臟中的活力，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；

4、相同受試物與低劑量組比較，差別均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；iAs3+和iAs5+高劑量組間比較，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；iAs3+和iAs5+低劑量組比較，差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；4.高劑量iAs3+和iAs5+可降低大鼠血清中PK 活性，iAs3+和iAs5+高劑量組中的比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05)，iAs3+和iAs5+在中劑量組與低劑量組比較時差異均無統(tǒng)計學意義(p均>0.05)；5.從熒光定量PC

5、R的結果可見，iAs3+和iAs5+在大鼠肝臟中甲基化轉移酶mRNA的基因表達與正常對照組相比均有統(tǒng)計學差異（P<0.05)，隨著染砷劑量的增加，iAs3+As3MT基因的mRNA 表達呈上升趨勢，iAs5+As3MT基因的mRNA 表達呈下降趨勢，iAs3+和iAs5+高劑量組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；隨著染砷劑量的增加，iAs3+DNMT3A，3B基因的mRNA 表達呈下降趨勢，iAs5+DNMT3A，3B基因的mRNA

6、 表達呈上升趨勢，iAs3+和iAs5+高、低劑量組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；DNMT1基因的mRNA 表達中iAs3+和iAs5+高、中劑量組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論：1.iAs3+和iAs5+均可使大鼠肝臟組織中SAM的含量升高，通過SAM提供充足的甲基供體，增強機體的甲基化代謝能力。2.iAs3+或iAs5+可影響ARR的活力，還原酶的活性將直接影響甲基化的進程。3.iAs3+或iAs

7、5+染毒大鼠可改變MTR的活力，通過影響葉酸的正常代謝、細胞內DNA 甲基化反應以及脫氧核苷酸三磷酸鹽的生物合成，進而影響砷的作用機制。4.長期攝入過量iAs3+或iAs5+可降低丙酮酸激酶的活力，通過糖酵解作用改變砷甲基化的程度。5.長期慢性染砷（iAs3+或iAs5+）可使As3MT的mRNA 表達升高，并存在劑量關系，影響砷的甲基化程度；iAs3+或iAs5+可在大鼠肝臟中抑制DNMTs基因的mRNA的表達，表明不同價態(tài)的砷可通過