肝細胞癌中WIF-1基因甲基化及其表達的研究.pdf

1、肝細胞癌(以下簡稱肝癌)是臨床上最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和在腫瘤相關死亡中占據的比例均很高,嚴重威脅著人類的健康,因此,肝癌的防治成為腫瘤研究的重要課題。肝癌的發(fā)生發(fā)展是一個涉及多基因多步驟的復雜過程,其分子機制仍未完全闡明,抑癌基因啟動子區(qū)異常高甲基化可導致抑癌基因失活,是肝癌發(fā)生的重要因為之一。本文通過檢索相關文獻,分析肝癌發(fā)生的分子途徑,選取Wnt途徑中WIF-1基因作為研究對象,檢測其在肝癌中的甲基化和表達水平,結合臨床資

2、料探討其臨床意義。
　　 目的:探討WIF-1基因啟動子區(qū)甲基化的狀態(tài)與WIF-1 mRNA表達和肝癌發(fā)生發(fā)展的關系,評價檢測肝癌WIF-1基因啟動子區(qū)甲基化和基因表達的臨床意義。
　　 方法：收集53例成對的肝癌及相應癌旁組織,采用實時定量甲基化特異性PCR(Q-MSP)技術對組織中WIF-1基因的甲基化水平進行相對定量檢測；應用實時定量RT-PCR(Q-RT-PCR)檢測53例成對肝癌及相應癌旁組織、22例肝炎后肝硬

3、化、4例慢性肝炎和11例正常肝組織的WIF-1 mRNA的表達水平,分析WIF-1甲基化狀態(tài)與mRNA表達水平的關系以及兩者與臨床資料間的相關性。
　　 結果：Q-MSP檢測結果表明WIF-1基因在肝癌組織和癌旁組織中甲基化陽性例數分別為20例(37.7％)和3例(5.7％),癌組織中WIF-1基因甲基化頻率顯著高于癌旁組織；ROC分析表明WIF-1基因甲基化水平的差異可以高效地鑒別癌組織與非癌組織；Kaplan-Meier生存

4、曲線分析顯示甲基化陽性病例組的無瘤生存期顯著低于甲基化陰性病例組；WIF-1基因的甲基化狀態(tài)與性別、年齡、腫塊數目、是否肝硬化、Child-push分級及TNM分期等因素均未見明顯相關。
　　 對WIF-1 mRNA在各組組織中表達水平的分析顯示:正常肝組織與肝硬化、肝癌、癌旁組織組間的表達均存在統計學差異,正常肝組織組基因表達水平高于除慢性肝炎的其它各組；肝癌組基因表達水平顯著低于癌旁組織組。WIF-1基因表達水平與臨床資料相

5、關性分析未見明顯相關性,高表達組和低表達組的無瘤生存期未見統計學差異。
　　 53例成對肝癌及癌旁組織標本中,肝癌組織相對于癌旁組織WIF-1表達顯著下調的有31例,其中,在甲基化陽性、陰性標本里分別為11例(55％)和20例(60.6％)。肝癌與癌旁組織WIF-1 mRNA表達的下調與甲基化狀態(tài)之間未見相關性。
　　 結論：檢測WIF-1基因的甲基化狀況有助于肝癌的診斷與預后評估,可能作為一種具有臨床診斷價值的分子標志