2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩48頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、背景:肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是我國常見的惡性腫瘤之一,目前針對其早期診斷及分子靶向治療的研究日漸成為研究中的熱點。HCC的形成(和發(fā))展受遺傳學(xué)機(jī)制(geneticmechanism)和表觀遺傳學(xué)機(jī)制(epigeneticmechanism)()共同調(diào)控,是一種多基因共同參與的級聯(lián)調(diào)控過程,最終導(dǎo)致癌基因的激活或抑煽基因的失活。表觀遺傳學(xué)指不發(fā)生DNA序列改變的基因表達(dá)改變,DNA甲基化和組蛋

2、白修飾是其中的兩個主要內(nèi)容。近年來研究顯示,人類腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與DNA甲基化異常有關(guān),特異基因的甲基化檢測可以作為癌癥早期診斷的分子標(biāo)記物、治療的靶點和判斷預(yù)后的手段。3-O-硫基轉(zhuǎn)移酶-2(heparansulfateD-glucososaminyl3-O-sulfotransferase-2,3-OST-2)基因表達(dá)缺失致使硫酸乙酰糖蛋白修飾不完全,與腫瘤發(fā)展有密切關(guān)系,但是具體機(jī)制尚不清楚。DNA甲基化往往與組蛋白修飾相互作用共

3、同調(diào)控基因的表達(dá)。比之DNA甲基化,組蛋白修飾的調(diào)控更為復(fù)雜,不同組蛋白中的不同氨基酸可以發(fā)生多種不同類型的修飾,其中組蛋白乙?;腿ヒ阴;墙M蛋白修飾中的重要內(nèi)容。新近的研究發(fā)現(xiàn),UHRF1不僅可通過DNA解螺旋酶識別甲基化位點,在確保DNA甲基化的正確復(fù)制中起重要作用,還能識別甲基化的組蛋白,具有雙重識別DNA和組蛋白甲基化的功能,但UHRF1如何調(diào)控抑癌基因表達(dá),在肝細(xì)胞癌中發(fā)揮怎樣的作用目前尚不清楚。
   目的:探討3

4、-OST-2啟動子甲基化在HCC發(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)制,檢測DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNAmethyltrasferases,DNMT)抑制劑5-氮雜-2',脫氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)和組蛋白去乙?;?histonedeacetylases,HDAC)抑制劑曲古菌素A(trichostatinA,TSA)對HCC細(xì)胞株中3-OST-2基因啟動子區(qū)甲基化水平、基因表達(dá)以及對核轉(zhuǎn)錄因子UHRF1

5、的影響。
   方法:培養(yǎng)HCC細(xì)胞株,實驗分為4組:(1)未加藥HCC細(xì)胞株對照組;(2)5-Aza-dC單獨處理組;(3)TSA單獨處理組;(4)5-Aza-dC+TSA聯(lián)合處理組。采用甲基化特異性PCR(methylation-specificpolymerasechainreaction,MSP)法檢測藥物作用前后HCC細(xì)胞株中3-OST-2啟動子區(qū)甲基化的狀態(tài)改變,實時熒光定量PCR(Real-timepolymera

6、sechainreaction,RT-PCR)法檢測3-OST-2和UHRFlmRNA的表達(dá)變化,采用Westernblotting和細(xì)胞爬片免疫組化法檢測不同處理組UHRF1蛋白的表達(dá)變化。
   結(jié)果:3-OST-2在HCC細(xì)胞株中呈完全甲基化狀態(tài),5-Aza-dC或TSA單獨均能部分逆轉(zhuǎn)3-OST-2甲基化,mRNA表達(dá)分別增加2.7倍和4.9倍,兩藥聯(lián)合處理后,3-OST-2甲基化被完全逆轉(zhuǎn),mRNA表達(dá)增加9.1倍。5

7、-Aza-dC或TSA均能降低UHRF-1mRNA和蛋白表達(dá),TSA比5-Aza-dC療效更好(P<0.01),兩藥聯(lián)用具有協(xié)同作用(P<0.01)。細(xì)胞爬片免疫組化結(jié)果顯示,UHRF1蛋白在HCC細(xì)胞株中陽性表達(dá)率較高(94%),經(jīng)5-Aza-dC處理后UHRF1蛋白表達(dá)陽性率降低為69%;與未加藥HCC細(xì)胞株對照組相比,差別在統(tǒng)計學(xué)上有意義(P<0.01)。而TSA處理后UHRF1蛋白表達(dá)顯著下降,陽性率為35%,抑制UHRF1蛋白

8、效果明顯好于TSA(P<0.01);兩種藥物聯(lián)合處理后,UHRF1蛋白陽性率降為27%。Westernblotting結(jié)果表明兩種藥物均可抑制UHRF1蛋白表達(dá),兩藥聯(lián)用效果更為明顯。
   結(jié)論:3-OST-2基因表達(dá)降低在HCC中發(fā)揮重要作用。其表達(dá)受啟動子區(qū)甲基化和組蛋白去乙?;餐{(diào)控。UHRF1參與了3-OST-2基因表達(dá)調(diào)控通路中DNA甲基化和組蛋白去乙?;g的相互作用,并且對組蛋白乙?;恼{(diào)控作用大于對DNA甲基

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論