啟動(dòng)子區(qū)甲基化對(duì)肝細(xì)胞癌鋅指蛋白331表達(dá)的調(diào)控.pdf

1、目的:在世界范圍內(nèi),肝癌發(fā)病率居惡性腫瘤的第5位,其病死率占惡性腫瘤的第3位。肝癌的發(fā)病率呈逐年遞增的趨勢(shì),預(yù)后較差。在東亞地區(qū),肝細(xì)胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)作為肝癌的主要病理類(lèi)型,已成為發(fā)病率最高最具威脅的惡性腫瘤。研究發(fā)現(xiàn):遺傳調(diào)控和表觀遺傳調(diào)控紊亂導(dǎo)致基因異常表達(dá)及功能失調(diào)參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。其中,抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化起著至關(guān)重要的作用。與遺傳學(xué)不同,表觀遺傳學(xué)改變是可逆轉(zhuǎn)的,使其成為潛在

2、的疾病治療靶點(diǎn)。同時(shí),許多研究已經(jīng)證實(shí)DNA異常甲基化在腫瘤形成過(guò)程中是可逆的,這也為從表觀遺傳角度治療腫瘤提供了理論依據(jù)。研究證明:鋅指蛋白家族成員——鋅指蛋白331(ZNF331)在胃癌和多發(fā)性骨髓瘤中具有抑癌作用,ZNF331啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化導(dǎo)致其表達(dá)失活造成腫瘤的發(fā)生。而其在肝細(xì)胞癌中的研究報(bào)道鮮見(jiàn)。本文旨在研究ZNF331在肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的表觀遺傳學(xué)變化及對(duì)其表達(dá)的調(diào)控作用。結(jié)合分析病人的臨床資料,闡明ZNF331表觀遺

3、傳改變和肝細(xì)胞癌患者相關(guān)臨床病理特征的關(guān)系,以期獲得肝細(xì)胞癌診斷和預(yù)后的表觀遺傳學(xué)標(biāo)志物。
　　方法:本研究采用半定量RT-PCR方法在5株肝癌細(xì)胞系中檢測(cè)甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-aza-2'-deoxycytidine(5-aza-dc)處理前后ZNF331mRNA的表達(dá)變化;應(yīng)用甲基化特異性PCR檢測(cè)5株肝癌細(xì)胞系(SNU449、HBXF344、PLC/PRF/5、HepG2、BEL-7402)、10例正常肝組織、50例肝細(xì)胞癌組

4、織標(biāo)本中ZNF331的甲基化情況。應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析ZNF331甲基化和肝細(xì)胞癌臨床病理特征的相關(guān)性,P<0.05認(rèn)為具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:ZNF331在肝癌細(xì)胞系HBXF344、PLC/PRF/5、HepG2、BEL-7402中低表達(dá),SNU449中表達(dá)正常。5-Aza處理后HBXF344、HepG2、BEL-7402及PLC/PRF/5中ZNF331表達(dá)恢復(fù)正常。50例原發(fā)性肝細(xì)胞癌標(biāo)本中,ZNF3

5、31啟動(dòng)子區(qū)的甲基化率為80％(40/50),而10例正常肝臟組織中ZNF331啟動(dòng)子區(qū)均無(wú)甲基化。ZNF331啟動(dòng)子區(qū)的甲基化與肝細(xì)胞癌患者的性別、年齡、腫瘤直徑大小、血清甲胎蛋白值、肝炎病毒感染、分化水平及TNM分期均無(wú)關(guān)聯(lián)(p>0.05)。
　　結(jié)論:本文的研究結(jié)果顯示ZNF331啟動(dòng)子區(qū)甲基化率在肝癌細(xì)胞系及肝細(xì)胞癌組織中明顯高于正常肝組織。結(jié)果表明ZNF331在肝細(xì)胞癌中存在啟動(dòng)子區(qū)異常高甲基化,ZNF331啟動(dòng)子區(qū)高甲