OA患者關節(jié)軟骨Timp-3基因啟動子區(qū)甲基化及其蛋白表達的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 通過對骨關節(jié)炎患者關節(jié)軟骨細胞金屬蛋白酶抑制劑3(Timp-3)啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)及Timp-3蛋白表達的檢測，探討Timp-3啟動子區(qū)甲基化在骨關節(jié)炎(OA)發(fā)生、發(fā)展中的作用。
　　 方法：
　　 采用亞硫酸氫鈉(Sodium-Bisulfite)方法處理基因組DNA，甲基化特異性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法檢測Timp-3基因啟動子甲基化情況。免疫組化

2、方法檢測Timp-3蛋白表達。實驗分為兩組：對照組（14例，平均年齡40±8.97歲）和OA患者組（35例，平均年齡65±8.26歲）。
　　 采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件進行分析，行x2檢驗或Fisher’s確切概率法檢驗和Spearman等級相關分析。
　　 結果：
　　 1.OA患者與健康人軟骨細胞Timp-3啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)比較
　　 OA患者組與健康人對照組軟骨細胞Timp-3啟動子區(qū)甲基

3、化陽性率分別為74.3％(26/35)和35.7％(5/14)，經(jīng)x2檢驗，兩組間差異有統(tǒng)計學意義(x2＝6.402,P＝0.0114)。
　　 2.OA患者與健康人軟骨細胞Timp-3蛋白表達比較
　　 14例健康人軟骨細胞Timp-3蛋白10例有表達，而35例OA患者軟骨細胞有24例Timp-3蛋白不表達的，經(jīng)x2檢驗，OA患者組軟骨細胞Timp-3蛋白與健康人對照組比較，差異有顯著性意義(x2＝6.533,P＝0.

4、0106)。
　　 3.OA患者軟骨細胞Timp-3啟動子區(qū)與蛋白表達相關分析
　　 26例Timp-3啟動子甲基化陽性的OA患者中，有21例蛋白表達陰性；而24例Timp-3蛋白表達陰性的OA患者中，有21例Timp-3啟動子甲基化陽性，經(jīng)Spearman等級相關分析，Timp-3啟動子甲基化與蛋白表達呈顯著負相關(rs＝－0.447,P＜0.005)。
　　 結論：
　　 骨關節(jié)炎患者關節(jié)軟骨細胞TI