膝關(guān)節(jié)OA患者關(guān)節(jié)軟骨IL-6基因異常甲基化及蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)對(duì)膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎(Knee OA)患者關(guān)節(jié)軟骨IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)及IL-6蛋白表達(dá)的檢測(cè)，探討IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)的異常甲基化在膝關(guān)節(jié)OA發(fā)生、發(fā)展中的作用。
　　 方法:采用酚-氯仿抽提(Sodium-Bisulfite)方法處理基因組DNA，甲基化特異性PCR(methylation-specific PCR，MSP)方法檢測(cè)IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化變化情況。采用免疫組化方法檢測(cè)IL-6蛋白表達(dá)。實(shí)

2、驗(yàn)分為兩組:13例健康軟骨對(duì)照組和37例膝關(guān)節(jié)OA組。
　　 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)作x2或Fisher's確切概率法檢驗(yàn)和Spearman等級(jí)相關(guān)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.健康軟骨對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者關(guān)節(jié)軟骨IL-6啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)比較
　　 健康軟骨對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者關(guān)節(jié)軟骨IL-6啟動(dòng)子區(qū)甲基化百分率分別為76.92％(10/13)和21.62％(8/37)，

3、經(jīng)Fisher's確切概率法檢驗(yàn)分析，兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。
　　 2.健康軟骨對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者軟骨細(xì)胞IL-6蛋白表達(dá)比較健康軟骨對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者軟骨細(xì)胞IL-6蛋白陽(yáng)性率分別為30.77％(4/13)和72.97％(27/37)，經(jīng)Fisher's確切概率法檢驗(yàn)分析，兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.018)。
　　 3.IL-6基因低甲基化及蛋白的表達(dá)與年齡的關(guān)系
　　 I

4、L-6基因低甲基化及蛋白的表達(dá)與年齡無(wú)明顯相關(guān)性(似然比0.136，P=0.934)
　　 4.膝關(guān)節(jié)OA患者關(guān)節(jié)軟骨IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)低甲基化與蛋白表達(dá)相關(guān)性分析
　　 29例IL-6啟動(dòng)子區(qū)低甲基化的膝關(guān)節(jié)OA患者中，有24例蛋白表達(dá)呈現(xiàn)陽(yáng)性;而27例IL-6蛋白表達(dá)陽(yáng)性的膝關(guān)節(jié)OA患者中，有24例IL-6啟動(dòng)子區(qū)低甲基化，經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析，說(shuō)明IL-6啟動(dòng)子區(qū)低甲基化與IL-6表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.