ECM相關(guān)基因在兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞損傷后的表達(dá)變化.pdf

1、目的：檢測MMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-3及Col-II細(xì)胞外基質(zhì)因子在兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞劃傷后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化。
　　方法：從成年的新西蘭大白兔的膝關(guān)節(jié)股骨下端關(guān)節(jié)面分離出關(guān)節(jié)軟骨組織，進(jìn)行原代六孔板培養(yǎng)。待細(xì)胞長出基本完全融合時(shí)，將培養(yǎng)的細(xì)胞分成4組。分別為正常組，損傷后1、3、7天組。第1組不做任何處理，留作正常對照；第2至4組細(xì)胞使用無菌10μl槍頭在六孔板中呈“?！弊謩潅?，在劃痕過程中，力度與速度一致，其

2、中，間距為0.5 cm。采用實(shí)時(shí)PCR檢測1、3、7和0天時(shí)間點(diǎn)基質(zhì)金屬蛋白酶-2、3和9，基質(zhì)金屬蛋白酶抑制物-3及II型膠原相對表達(dá)水平。
　　結(jié)果：成功獲取軟骨，經(jīng)原代培養(yǎng)后成功建立損傷細(xì)胞模型。MMP-2 mRNA表達(dá)水平在損傷后1，3，7天均比正常組升高，其中第7天最高(P<0.05)。MMP-3 mRNA表達(dá)水平在細(xì)胞損傷后第1，3，7天均比正常組明顯下降，第7天最低(P<0.05)。 MMP-9 mRNA表達(dá)水平在損