膝關(guān)節(jié)OA患者關(guān)節(jié)軟骨TNF-α基因異常甲基化及蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 通過(guò)對(duì)膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎(KneeOA)患者關(guān)節(jié)軟骨TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)及TNF-α蛋白表達(dá)的檢測(cè)，探討TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化異常在膝關(guān)節(jié)OA發(fā)生、發(fā)展中的作用。
　　 方法：采用酚-氯仿抽提(Sodium-Bisulfite)方法處理基因組DNA，甲基化特異性PCR(methylation-specificPCR，MSP)方法檢測(cè)TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化變化情況。采用免疫組化方法檢測(cè)TN

2、F-α蛋白表達(dá)。實(shí)驗(yàn)分為兩組:13例健康人對(duì)照組和37例OA患者組。
　　 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，作x2或Fisher's確切概率法檢驗(yàn)和Spearman等級(jí)相關(guān)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.健康人對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者軟骨TNF-α啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)比較
　　 健康人對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者組軟骨TNF-α啟動(dòng)子區(qū)低甲基化百分率分別為15.38％(2/13)和75.67％(28/37)，

3、經(jīng)x2檢驗(yàn)分析，兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 2.健康人對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者軟骨細(xì)胞TNF-α蛋白表達(dá)比較
　　 健康人對(duì)照組與膝關(guān)節(jié)OA患者組軟骨細(xì)胞TNF-α蛋白陽(yáng)性率分別為23.08％(3/13)和78.37％(29/37)，經(jīng)x2檢驗(yàn)分析，兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 3.TNF-α基因甲基化及蛋白的表達(dá)與性別，年齡的關(guān)系
　　 TNF-α基因低甲基化及蛋

4、白的表達(dá)與性別，年齡無(wú)明顯相關(guān)性(P＞0.05)
　　 4.膝關(guān)節(jié)OA患者軟骨TNF-α基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與蛋白表達(dá)相關(guān)性分析
　　 28例TNF-α啟動(dòng)子區(qū)低甲基化的OA患者中，有25例蛋白表達(dá)呈現(xiàn)陽(yáng)性;而29例TNF-α蛋白表達(dá)呈現(xiàn)陽(yáng)性的OA患者中，有25例TNF-α啟動(dòng)子區(qū)呈現(xiàn)低甲基化，經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析，TNF-α啟動(dòng)子區(qū)低甲基化與蛋白的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。(r=0.467，P＜0.01)