人精子生精相關(guān)基因表達(dá)譜系的構(gòu)建及臨床應(yīng)用.pdf

1、在前期研究中,該實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了人睪丸cDNA基因芯片(包含9216個(gè)克隆),并用以篩選成人及胚胎睪丸的差異表達(dá)基因,構(gòu)建了睪丸發(fā)育/精子發(fā)生相關(guān)的基因表達(dá)譜系.其中有266個(gè)基因在成人睪丸高表達(dá),我們認(rèn)為其主要為精子發(fā)生相關(guān)基因.該研究中,用人精子cDNA探針與人睪丸cDNA芯片進(jìn)行雜交,分析266個(gè)成人睪丸高表達(dá)的基因在精子中的表達(dá)情況.對(duì)譜系中的6個(gè)基因用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)其在精子中的表達(dá)量,以驗(yàn)證芯片雜交結(jié)果.分別收集正常(n

2、=29)及弱精癥男性(n=24)精液標(biāo)本,定量檢測(cè)譜系中5個(gè)精子運(yùn)動(dòng)相關(guān)基因(TPX-1,ODF2,AKAP4,LDH及CLGN)在各精子標(biāo)本中的表達(dá)量后,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn),有兩個(gè)基因(TPX-1及LDHC)在正常組表達(dá)量高于弱精癥組,兩組間有顯著性差異.綜上,該研究構(gòu)建了人精子生精相關(guān)基因表達(dá)譜系,為研究精子功能相關(guān)基因創(chuàng)造了條件;對(duì)譜系中5個(gè)與精子運(yùn)動(dòng)相關(guān)的基因在正常及弱精癥男性精子標(biāo)本中的定量檢測(cè)結(jié)果提示精子mRNA表達(dá)量的高低與