霍山石斛保肝多糖的結(jié)構(gòu)表征與功效評價.pdf

1、霍山石斛（Dendrobium huoshanense）是我國一種稀有的藥用植物，其根莖（俗稱米斛）常被用做一種滋補、保健飲品。多糖是霍山石斛中一種活性顯著的化學(xué)組分，具有抗氧化和調(diào)節(jié)免疫等多種生物活性。本研究采用熱水浸提、陰離子交換和葡聚糖凝膠層析從霍山石斛中分離、純化出若干種不同的多糖組分，結(jié)合化學(xué)和波譜學(xué)方法分析了不同多糖組分的結(jié)構(gòu)特征;利用四氯化碳(Carbontetrachloride，CCl4)構(gòu)建的小鼠急性肝損傷模型對不同

2、多糖組分的保肝活性進行了評價，以期闡明霍山石斛保肝多糖的性質(zhì)特征，建立其功能與結(jié)構(gòu)之間的聯(lián)系。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.利用DEAE-纖維素陰離子交換樹脂從霍山石斛粗多糖(DHP)中分離出4中不同的多糖組分。DHP1為中性多糖，主要由葡萄糖、半乳糖和微量的甘露糖組成，相對分子質(zhì)量為10 KDa;其余三種多糖組分為酸性多糖，其中DHP2和DHP3中含有較多的半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖，而DHP4中則主要由半乳糖、鼠李糖、

3、阿拉伯糖和葡萄糖組成;三種多糖的相對分子質(zhì)量均在5000 KDa以上。與三種酸性多糖相比，DHP1清除DPPH自由基和羥基自由基的能力更強，同時可以更有效地抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，是DHP中有效的抗氧化多糖組分;
　　2.利用CCl4構(gòu)建了小鼠的急性肝損傷模型，評價了霍山石斛中不同多糖組分的保肝活性。結(jié)果表明，DHP1的預(yù)處理可以有效增強小鼠肝組織對CCl4毒性的抵抗力，降低了CCl4誘導(dǎo)的血清中谷丙酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(A

4、ST)活性的升高，抑制了肝組織中丙二醛(MDA)的過量表達，同時恢復(fù)了超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)的活性，呈現(xiàn)出良好的預(yù)防肝損傷作用;
　　3.采用Sephadex G-100凝膠層析對DHP1進一步分離和純化，得到DHP1A和DHP1B兩種多糖片段。DHP1A的相對分子質(zhì)量為6.7KDa，主要由葡萄糖和甘露糖組成;甲基化和核磁共振研究發(fā)現(xiàn)，DHP1A的主鏈主要由1→4連接的葡萄糖和1→4連接的甘露糖構(gòu)成。DHP

5、1B的相對分子質(zhì)量為3.51 KDa，主要由葡萄糖組成，其主鏈則主要由1→4和1→4，6連接的葡萄糖構(gòu)成。體外抗氧化實驗表明，DHP1A清除DPPH自由基和羥基自由基的能力，以及抑制脂質(zhì)過氧化的能力均高于DHP1B;
　　4.進一步評價了DHP1A的保肝功效，結(jié)果表明，DHP1A的攝入可以有效降低CCl4肝損傷中各種生化指標的升高，降低了丙二醛和8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)的產(chǎn)生;DHP1A可以調(diào)節(jié)小鼠肝內(nèi)各種炎性分子的表達，