霍山石斛多糖激活巨噬細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究.pdf

1、本文以霍山石斛多糖(DHP)為材料,以巨噬細(xì)胞為對象,旨在對霍山石斛多糖的免疫細(xì)胞受體及其介導(dǎo)的下游信號通路進(jìn)行研究,以期闡明霍山石斛多糖激活巨噬細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
　　取得的研究結(jié)果如下:
　　(1)濃度梯度實(shí)驗(yàn)表明,DHP能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌NO、TNF-α和IL-1β,且具有一定的劑量依賴性,當(dāng)濃度達(dá)到100μg/mL時,三種因子的分泌較對照組顯著提高。
　　(2)基于多糖熒光標(biāo)記技術(shù),激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)

2、胞儀分析發(fā)現(xiàn),DHP可以與巨噬細(xì)胞專一性地結(jié)合,且這種結(jié)合具有飽和性、能被抗TLR4抗體抑制。藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示,抗TLR4抗體幾乎完全阻斷了DHP誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO、TNF-α和IL-1β,且DHP對野生型小鼠C3H/HeN腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO、TNF-α和IL-1β的作用顯著強(qiáng)于TLR4基因缺陷型小鼠C3H/HeJ腹腔巨噬細(xì)胞對DHP的響應(yīng)。這些結(jié)果表明,DHP主要通過TLR4激活巨噬細(xì)胞。
　　(3)Western Blot分