羊肚菌多糖生物活性及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究.pdf

1、研究采用國內(nèi)分布最為廣泛的羊肚菌(Morchella esculenta(L.) Pers.5.69)和高羊肚菌(Morchella elata(L.)5.29)為材料,比較兩種羊肚菌多糖在含量和藥理活性上的區(qū)別。實(shí)驗(yàn)提取了兩類羊肚菌的胞外多糖MEPA和MEPB,分別對其純化獲得四種多糖純品:MEP1、MEP2、MEP3、MEP4,對MEP1和MEP2的性質(zhì)進(jìn)行了分析,MEP1總糖含量為86％,蛋白含量為8.5％;MEP2總糖含量為94

2、％;蛋白含量為3.1％。MEP1紅外光譜分析含α型糖苷鍵及吡喃糖環(huán)吸收峰;MEP2紅外光譜分析有吡喃糖環(huán)的醚鍵C=O=C伸縮振動峰及α-糖苷鍵的伸縮振動峰。MEP1鍵型為1→3鍵38.2％,1→6連接7.2％,1→2/1→4鍵54.6％;MEP2鍵型為1→3鍵16.4％,1→6連接2.4％,1→2/1→4鍵81.2％。MEP1的相對分子量為2.48×106，MEP2的相對分子量為1.94×104。MEP1單糖組成為木糖,甘露糖和葡萄糖,

3、其摩爾比為17.1:32.4:43.3;MEP2單糖組成為阿拉伯糖,葡萄糖和半乳糖,其摩爾比為32.5:71.1:7.9。
　　體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明羊肚菌多糖有較高的免疫活性,可提升小鼠胸腺指數(shù)及脾指數(shù),提高血清溶菌酶含量、巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)。另取MEP2對Cy誘導(dǎo)的免疫低下鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)其同樣可提升胸腺指數(shù)及脾指數(shù),增加廓清指數(shù)及吞噬指數(shù),同時增加血清溶血形成及外周血T淋巴細(xì)胞比率。綜合羊肚菌多糖對正常小鼠和Cy誘導(dǎo)的免疫低下鼠

4、的研究表明,羊肚菌胞外多糖有良好的免疫活性,且主要表現(xiàn)在對細(xì)胞免疫的增強(qiáng)和對非特異性免疫的促進(jìn)這兩個方面。體外實(shí)驗(yàn)采用MTT法檢測羊肚菌多糖對脾淋巴細(xì)胞的毒性結(jié)果表明,兩類羊肚菌多糖MEPA及MEPB在10～200μg/mL范圍內(nèi),對脾淋巴細(xì)胞沒有直接細(xì)胞毒性。對脾臟細(xì)胞多糖的MTT實(shí)驗(yàn)表明,兩類羊肚菌多糖MEPA及MEPB對B淋巴細(xì)胞均無明顯促進(jìn)作用,而對純化的淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞均有非常明顯的增殖促進(jìn)作用,且該作用在濃度為50μg/

5、mL時最為顯著。在動物體內(nèi),T淋巴細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫,而B淋巴細(xì)胞主要作用在于體液免疫,以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明MEP在體外有較為明顯的細(xì)胞免疫活性。同時羊肚菌多糖MEPA及MEPB能明顯促進(jìn)巨噬細(xì)胞NO的釋放量,該作用在濃度為30μg/mL時最為明顯。
　　體外MTT實(shí)驗(yàn)表明羊肚菌多糖MEPA及MEPB均可于體外直接殺死Hep2腫瘤細(xì)胞。采用MEP1組分進(jìn)行實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其在體外可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞Hep2凋亡,且該效應(yīng)隨著多糖濃度的增加而增