酵母cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及時(shí)序衰老機(jī)制研究.pdf

1、釀酒酵母的cAMP信號(hào)通路，即Ras/cAMP/PKA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在調(diào)控酵母細(xì)胞代謝、增殖、分化及壓力抗性的獲得過(guò)程中具有及其重要的作用，因此，在過(guò)去二十年里，這條信號(hào)通路引起了極大的關(guān)注和廣泛深入的研究。目前該信號(hào)通路的許多組成成分已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)，所傳導(dǎo)的信號(hào)的性質(zhì)及功能也被人們所初步認(rèn)識(shí)，但是許多科學(xué)問(wèn)題仍然有待于我們?nèi)ヌ剿鳌?br>　　 本論文的主要研究?jī)?nèi)容是:Pde1和Pde2兩個(gè)磷酸二酯酶對(duì)細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的調(diào)節(jié)作用;Ras1

2、和Ras2對(duì)酵母細(xì)胞內(nèi)cAMP合成的影響;氮源和Sch9蛋白激酶對(duì)Ras-cAMP信號(hào)通路的調(diào)控作用;酵母細(xì)胞時(shí)序壽命與Ras-cAMP信號(hào)通路的活性及細(xì)胞熱激抗性的關(guān)系。
　　 我們的研究結(jié)果證明在PKA活性組成型減弱菌株JT123中，Pde1對(duì)cAMP信號(hào)通路的影響不大，Pde2較Pde1具有顯著的影響作用。另外我們發(fā)現(xiàn)，Pde1除了參與PKA對(duì)葡萄糖誘導(dǎo)的cAMP信號(hào)的反饋抑制作用外，還對(duì)細(xì)胞內(nèi)的基礎(chǔ)cAMP水平起重要的調(diào)

3、節(jié)作用，這種作用主要發(fā)生在細(xì)胞生長(zhǎng)的穩(wěn)定期。
　　 不同的RAS基因(RAS1和RAS2)缺失，對(duì)Ras-cAMP信號(hào)通路產(chǎn)生不同的影響，Ras2較Ras1對(duì)該信號(hào)通路具有更大的影響作用。不同RAS基因所表現(xiàn)出來(lái)的對(duì)于Ras-cAMP信號(hào)通路的不同活性主要是由于兩個(gè)RAS基因的啟動(dòng)子強(qiáng)弱的不同，而不是兩個(gè)基因所編碼的蛋白的特性的不同。
　　 氮源對(duì)酵母細(xì)胞感知環(huán)境中的葡萄糖，即葡萄糖激活cAMP信號(hào)通路起非常重要的作用。

4、在氮源存在條件下Sch9蛋白激酶對(duì)Ras-cAMP信號(hào)通路起正調(diào)控作用，在氮源缺乏條件下，Sch9蛋白激酶對(duì)Ras-cAMP信號(hào)通路起負(fù)調(diào)控作用。顯然Sch9把環(huán)境中葡萄糖的存在與細(xì)胞生長(zhǎng)的其它必要營(yíng)養(yǎng)成分，如氮源的存在這些環(huán)境信息整合起來(lái)，以協(xié)調(diào)細(xì)胞的生命活動(dòng)。
　　 以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的酵母細(xì)胞，其時(shí)序壽命與Ras-cAMP信號(hào)通路的活性負(fù)相關(guān)，而與細(xì)胞的熱激抗性正相關(guān);但是，以甘油為碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的酵母細(xì)胞，