cAMP-PKA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在預(yù)處理心肌保護(hù)機(jī)制中的研究.pdf

1、缺血預(yù)處理(IPC)可減輕心肌缺血再灌注(I/R)損傷，但因臨床實(shí)施具有不可控性而使其應(yīng)用受到限制。藥物預(yù)處理(PP)與IPC有相似的效果，并因可控性強(qiáng)臨床應(yīng)用前景良好。已有的研究顯示PKC可介導(dǎo)IPC，近來文獻(xiàn)報(bào)道增加細(xì)胞cAMP的藥物亦具有不依賴于PKC的心肌保護(hù)作用，由此推測(cè)cAMP-PKA信號(hào)途徑介入了預(yù)處理過程。炎癥損傷貫穿于心肌I/R損傷全過程，具有炎性因子基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的NF-kB在心肌損傷中起著重要作用。該課題研究了預(yù)

2、處理是否可通過cAMP-PKA信號(hào)途徑抑制NF-kB活化，減少炎性因子基因轉(zhuǎn)錄，繼而減輕心肌I/R損傷。 材料與方法： 50只SD大鼠，體重300～350g，隨機(jī)分為5組(每組10只)：I/R組、IPC組、H89(PKA抑制劑)組、PDTC(NF-kB抑制劑)組和db-cAMP組。建立大鼠心臟Langendorff灌注模型。在平衡期、復(fù)灌10min、20min、30min記錄血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)、冠脈流量，測(cè)定冠脈流出液中LD

3、H、CK含量。檢測(cè)復(fù)灌30min后心肌組織中NF-kB-DNA結(jié)合活性(EMSA)，TNF-amRNA(Real-time PCR)，磷酸化的CREB(Serl33)、Ird3-a(Ser32/36)和NF-кBp65(Ser276)含量(Western blotting)。 結(jié)果： 1、I／R組心肌組織中NF-κB-DNA結(jié)合活性、磷酸化的NF-κBp65(Ser276)含量以及TNF-a mRNA表達(dá)與IPC和db-

4、cAMP預(yù)處理組相比明顯升高(P<0.01)，而與H89和PDTC組相比差異不顯著。IPC、PDTC和db-cAMP組中磷酸化的CREB(Ser133)顯著高于I／R組和H89組(P<0.01)。I／R組和PDTC組中磷酸化的Iκ-B-a(Ser32／36)顯著高于其余三組(P<0.01)。 2、在I／R組、H89和PDTC組，復(fù)灌期心功能損傷嚴(yán)重，IPCTT和db-cAMP組復(fù)灌30min時(shí)心功能恢復(fù)優(yōu)于其余三組(P<0.05