引起皮膚和軟組織感染金黃色葡萄球菌的分子特征和毒力基因譜.pdf

1、目的:金黃色葡萄球菌是引起皮膚和軟組織感染的最常見病原菌，還可以導(dǎo)致下呼吸道感染、血流感染、外周靜脈導(dǎo)管相關(guān)性感染、神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病、外周化膿性感染、感染性心內(nèi)膜炎、敗血癥等多種感染性疾病，是引起社區(qū)及醫(yī)院獲得性感染最重要的病原菌之一。本研究的主要目的是探討引起皮膚和軟組織感染金黃色葡萄球菌的分子特征、毒力基因譜及抗菌藥物耐藥譜。
　　方法:128株引起皮膚和軟組織感染金黃色葡萄球菌是溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2012年1月至20

2、13年9月期間收集和分離的。所有菌株均從不同患者的膿液樣本分離的，并且一個(gè)患者只選擇初次分離株。納入后的所有金黃色葡萄球菌菌株都是經(jīng)過革蘭染色、觸酶試驗(yàn)、凝固酶試驗(yàn)和Vitek微生物分析儀進(jìn)行金黃色葡萄球菌菌種鑒定的。應(yīng)用普通PCR方法(Polymerase ChainReaction)測(cè)定所有標(biāo)本的多種毒力基因。應(yīng)用多重PCR方法進(jìn)行耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin.resistant Staphylococcus a

3、ureus，MRSA)的SCCmec分型。應(yīng)用多位點(diǎn)基因序列分型(multilocus sequence typing，MLST)技術(shù)和金黃色葡萄球菌A蛋白基因序列分析(spa typing)分型對(duì)金黃色葡萄球菌株進(jìn)行序列分型。檢測(cè)金黃色葡萄球菌對(duì)多種常用抗菌藥物的敏感性是利用紙片擴(kuò)散法（K-B法），藥敏結(jié)果按照CLSI(Clinical and LaboratoryStandards Institute，美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì))推薦

4、的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
　　結(jié)果:128株引起皮膚和軟組織感染金黃色葡萄球菌中，確定為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)比例為44.5％(57/128)。72.7％(93/128)的金黃色葡萄球菌菌株為多重耐藥菌，即對(duì)三類或三類以上所測(cè)抗菌藥物耐藥。所有的菌株均攜帶至少5種所測(cè)定毒力基因。所有測(cè)定的毒力基因中，陽性率70％以上基因包括hld(100％)、hla(95.3％)、icaA(96.9％)、clf(99.2％)、sdrC(79.7

5、％)、sdrD(70.3％)及sdrE(72.7％)。56株(43.75％，56/128)金黃色葡萄球菌菌株中攜帶至少10種以上所測(cè)毒力基因。54.4％(31/57)的MRSA菌株攜帶10種以上毒力基因，陽性率明顯高于MSSA菌株(35.2％，25/71)(P＜0.05)。MRSA菌株中seb、sen、sem、sdrE以及pcl基因陽性率明顯高于MSSA菌株(P＜0.05)。在128株引起皮膚和軟組織感染金黃色葡萄球菌株，共發(fā)現(xiàn)28種S

6、T型和52種spa型。ST7及ST630為主要ST型，所占的比例都為10.9％。最主要spa型為t091，占8.6％。在57株MRSA菌株中，MRSA-ST59-SCCmecⅣ為最常見的克隆，占12.3％。在所有MSSA菌株中，最常見克隆型為MSSA-ST7，占15.5％，其次為MSSA-ST630，占12.7）。eBURST v3聚類分析共發(fā)現(xiàn)6種克隆群，包含CC5(52.3)、CC7(11.7％)、CC59(8.6％)、CC88(6

7、.3％)、CC398(4.7％)及CC121(3.1％)。CC5菌株相比CC7、CC59菌株而言，攜帶更多的腸毒素基因。sdrC、sdrD在CC5和CC7菌株中的陽性率較高，均大于＞80％;而sdrC和sdrD在CC59菌群陽性率則較低。所有CC59菌群均對(duì)慶大霉素及復(fù)方新諾明敏感，然而CC5菌株對(duì)慶大霉素及復(fù)方新諾明的耐藥率分別為25.4％及20.9％，同時(shí)CC7菌株對(duì)慶大霉素及復(fù)方新諾明的耐藥率均為40.0％。CC5菌株對(duì)四環(huán)素、克