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文檔簡介
1、目的:通過觀察清熱化痰方(以下簡稱W)及其兩個拆方,清熱方(以下簡稱Q),化痰方(以下簡稱H)對人腦膠質(zhì)瘤細胞SHG-44增殖抑制和EGFR-PI3K-Akt信號轉(zhuǎn)導通路的影響,研究清熱、化痰法治療人腦膠質(zhì)瘤的機理,探討熱毒及痰凝與人腦膠質(zhì)瘤病變和EGFR-PI3K-Akt信號轉(zhuǎn)導的關系。
方法:采用人腦膠質(zhì)瘤細胞SHG-44為實驗對象,用倒置顯微鏡觀察細胞生長情況,MTT法計算細胞抑制率,篩選出有效藥物;選用正交設計試驗選出
2、療效最佳的方劑;設對照組和用清熱化痰方及其兩個拆方處理細胞,在倒置顯微鏡下觀察SHG-44細胞生長狀態(tài)及形態(tài)改變,用Westernblot檢測各藥物組對SHG-44細胞EGFR-PI3K-Akt信號轉(zhuǎn)導通路各蛋白表達的影響。
結(jié)果:①清熱化痰方及其拆方對SHG-44細胞增殖顯著抑制,對細胞形態(tài)較大影響,清熱組多數(shù)細胞縮小,細胞間隙加大,不少細胞發(fā)生空泡變性;化痰組細胞形態(tài)發(fā)生改變,部分變圓,細胞表面粗糙,透光度減低,貼壁性變差
3、;全方組細胞表面粗糙,細胞縮小,變圓,呈現(xiàn)空泡樣結(jié)構(gòu)。②清熱化痰方及其拆方均能抑制SHG-44細胞生長,全方作用最強,隨藥物濃度、時間的增加,對細胞增殖抑制呈現(xiàn)劑量-效應與時間-效應依賴關系。③人腦膠質(zhì)瘤SHG-44細胞可檢測到EGFR、PI3K、Akt蛋白分子的過度表達。④當用IC50藥物濃度處理細胞時,清熱化痰方及其拆方均能下調(diào)EGFR-PI3K-Akt信號通路各蛋白表達水平。
結(jié)論:①清熱化痰方及其拆方均能顯著抑制人腦膠
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