超聲造影劑介導(dǎo)PTEN基因影響卵巢癌的實驗研究.pdf

1、本實驗選用卵巢癌細(xì)胞株進行體外實驗，觀察超聲造影劑介導(dǎo)基因治療的可行性，研究超聲照射時間和超聲造影劑劑量對人野生型PTEN質(zhì)粒導(dǎo)入人卵巢癌細(xì)胞效果的影響，目的是探討一種新型、高效的基因?qū)敕椒癙TEN基囚影響卵巢癌的實驗研究。實驗分為三部分：論文一探討了超聲造影劑促進細(xì)胞轉(zhuǎn)染的體外實驗?zāi)Ｊ降慕?。論文二研究了超聲造影劑介?dǎo)PTEN基因轉(zhuǎn)染人卵巢癌細(xì)胞及其相關(guān)特性。論文三探討了超聲造影劑介導(dǎo)PTEN基因轉(zhuǎn)染對人卵巢癌細(xì)胞體外粘附、遷移和

2、侵襲影響的研究。并對相應(yīng)的作用機制進行了初步探討，試圖為進一步的超聲治療卵巢癌體內(nèi)試驗研究提供依據(jù)，并為卵巢癌治療提供新的思路。 目的：探討超聲介導(dǎo)造影劑微泡破裂法促進外源性基因定向轉(zhuǎn)移的實驗?zāi)Ｊ?，以期為腫瘤的基因治療研究提供新思路。 結(jié)果在目的基因轉(zhuǎn)染過程中，轉(zhuǎn)染方法對靶細(xì)胞的安全性是實驗首先考慮的因素。通過不同實驗組以MTT法檢測不同超聲照射時間對細(xì)胞的殺傷作用，結(jié)果顯示：在超聲作用強度0.7W/cm<'2>，作用時間小

3、于60s，對靶細(xì)胞安全性較高，隨超聲照射時間延長，細(xì)胞存活率明顯下降。國外有關(guān)研究顯示，當(dāng)超聲功率大于0.6W/cm<'2>時，目的基因在靶細(xì)胞才能有效表達。所以，本實驗設(shè)定超聲參數(shù)為：超聲波強度0.7W/cm<'2>，作用時間30s。當(dāng)超聲強度為0.7W/cm<'2>，MI為1.0，作用時間30秒時，檢測體外培養(yǎng)細(xì)胞實驗組存活率是70.01％，通過組間對照細(xì)胞活性無明顯影響，隨著超聲照射時間的延長，細(xì)胞存活率明顯下降；造影劑濃度是10