干擾素治療慢性丙型肝炎患者T細(xì)胞亞群及PD-1、B細(xì)胞的表達(dá)變化.pdf

1、目前全球大約有2億人感染HCV，而丙型肝炎慢性化的比列高達(dá)60％-70%，其中5%-20%發(fā)展為纖維化，所以慢性丙型肝炎（chronichepatitis C，CHC）已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅人類健康的公共衛(wèi)生問(wèn)題。有研究發(fā)現(xiàn)，丙型肝炎慢性化的主要成因包括病毒迅速變異導(dǎo)致對(duì)機(jī)體的免疫逃避，以及人體內(nèi)的淋巴細(xì)胞出現(xiàn)功能缺失而不能有效清除病毒。人體內(nèi)淋巴細(xì)胞出現(xiàn)功能缺失可能與T細(xì)胞凋亡、外周組織耐受和T細(xì)胞疲耗等機(jī)制有關(guān)，也可能與B細(xì)胞功能失調(diào)有關(guān)

2、。B細(xì)胞功能失調(diào)，國(guó)外有學(xué)者報(bào)道認(rèn)為HCV感染者B淋巴細(xì)胞升高，考慮CHC患者長(zhǎng)期丙肝病毒抗原刺激，導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞不斷克隆增殖所致，而在國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)有關(guān)B淋巴細(xì)胞變化報(bào)道。國(guó)外許多學(xué)者認(rèn)為T細(xì)胞（包括HCV特異性效應(yīng)CD8+T細(xì)胞和輔助性CD4+T細(xì)胞）功能失調(diào)與PD-1及其配體表達(dá)上調(diào)有關(guān)。 PD-1,被命名為程序性死亡分子，可在CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、自然殺傷性T細(xì)胞（NKT）、B細(xì)胞和單核細(xì)胞等表面誘導(dǎo)表達(dá)。功能分析表明，P

3、D-1的胞質(zhì)功能域包含兩個(gè)酪氨酸信號(hào)傳遞基序，磷酸化后可與酪氨酸磷酸化酶SHP-2結(jié)合，使下游效應(yīng)分子如酪氨酸激酶（Syk）和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)脫磷酸化，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。PD-1和相應(yīng)配體PD-L結(jié)合后，產(chǎn)生一種免疫抑制信號(hào)，抑制了CD4+T細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)功能及CD8+T細(xì)胞的病毒清除功能，使HCV不能被有效的清除，導(dǎo)致丙肝感染的慢性化。慢性丙型肝炎的治療主要以抗病毒為主，其公認(rèn)的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)治療方案是聚乙二醇干擾素(Pegyla

4、ted interferon,PEG-IFN)聯(lián)合利巴韋林(ribavirin, RBV),主要通過(guò)免疫調(diào)節(jié)、增加機(jī)體抗病毒免疫功能和直接抑制病毒復(fù)制的雙重作用機(jī)制，可使治療的持續(xù)應(yīng)答率由普通干擾素的40%提高至70%左右,但在現(xiàn)有的治療條件下,仍有相當(dāng)一部分患者對(duì)治療無(wú)應(yīng)答或治療后復(fù)發(fā)。對(duì)于干擾素治療療效的預(yù)測(cè)一直是近年研究的熱點(diǎn)，目前認(rèn)為,病毒因素和宿主因素共同影響著干擾素治療的結(jié)局。此外,治療過(guò)程中不同的病毒學(xué)應(yīng)答模式對(duì)治療效果的

5、預(yù)測(cè)有著重要價(jià)值。對(duì)于不同應(yīng)答模式下T細(xì)胞亞群及其表面PD-1的表達(dá)、B細(xì)胞的變化，目前國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道較少。本研究對(duì)采用PEG-IFNα-2a聯(lián)合利巴韋林治療的141例慢性丙型肝炎患者中篩選出出現(xiàn)快速病毒學(xué)應(yīng)答20例及無(wú)應(yīng)答患者20例進(jìn)行了回顧性分析.觀察干擾素治療過(guò)程中慢性丙型肝炎患者T細(xì)胞亞群及其表面PD-1、B細(xì)胞表達(dá)水平，探討CHC患者干擾素治療過(guò)程中出現(xiàn)快速病毒學(xué)應(yīng)答及無(wú)應(yīng)答患者的機(jī)體免疫狀況及其與PD-1的關(guān)系。
　　研

6、究目的：
　　觀察干擾素治療慢性丙型肝炎患者T細(xì)胞亞群(CD4T+、CD8T+)及其表面PD-l、B細(xì)胞表達(dá)水平變化及其臨床意義。
　　研究方法：
　　受試對(duì)象為接受聚乙二醇化干擾素α-2a抗病毒治療的141例慢性丙型肝炎患者中篩選出快速病毒學(xué)應(yīng)答者(RVR)20例，無(wú)應(yīng)答者(NR)20例。并以20例健康體檢者作為正常對(duì)照組。采用流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)慢丙肝治療前及治療12周時(shí)外周血T細(xì)胞亞群及其表面PD-1的表達(dá)、B細(xì)胞

7、的表達(dá)水平；全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT、TBIL水平；采用COBAS AmpliPrep/COBASTaqMan48自動(dòng)載量?jī)x檢測(cè)HCV-RNA載量。
　　研究結(jié)果：
　　1.與正常對(duì)照組比較，慢性丙型肝炎患者CD4+T細(xì)胞增高,CD4+T/CD8+T增高,CD19+B細(xì)胞增高,CD8+T細(xì)胞降低, T細(xì)胞亞群(CD4T+、CD8T+)表面PD-1的表達(dá)明顯升高，結(jié)果均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　2.慢性丙

8、型肝炎患者血清ALT水平、TBIL水平與外周血T細(xì)胞亞群(CD4T+、CD8T+)表面PD-1的表達(dá)之間，其相關(guān)性分析的結(jié)果呈現(xiàn)負(fù)數(shù)，但統(tǒng)計(jì)學(xué)分析其差異無(wú)顯著性意義（P>0．05）。外周血T細(xì)胞亞群(CD4T+、CD8T+)表面PD-1的表達(dá)與與HCV-RNA載量無(wú)相關(guān)性（r=-O．105，0．268，P>0．05）。
　　3.聚乙二醇化干擾素治療慢性丙型肝炎患者12周時(shí)，無(wú)應(yīng)答組與快速病毒學(xué)應(yīng)答組患者比較，CD4+T細(xì)胞增高，C

9、D4+T/CD8+T增高，CD19+B細(xì)胞增高,CD8+T細(xì)胞降低，結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或＜0.05）。無(wú)應(yīng)答組患者T細(xì)胞亞群（CD4T+、CD8T+）上表達(dá)的PD-1明顯升高，其差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　研究結(jié)論：
　　1.慢性丙型肝炎患者體內(nèi)存在T細(xì)胞亞群失衡及B淋巴細(xì)胞升高，經(jīng)PEG-IFN治療后，其免疫功能得到一定恢復(fù)。
　　2.PD-1的高表達(dá)與HCV持續(xù)感染有關(guān)，可能是導(dǎo)致T淋