臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量與新生兒感染發(fā)生的關(guān)系的前瞻性研究.pdf

1、背景及目的：
　　新生兒容易發(fā)生感染，目前全球新生兒感染的發(fā)病率約7/1000例活產(chǎn)嬰兒。同時(shí)，新生兒感染的死亡率高,感染仍是造成新生兒死亡的三大原因之一,約32％的新生兒死亡與感染有關(guān)。但是，新生兒感染的臨床表現(xiàn)具有不典型性、多樣性、隱匿性的特點(diǎn)，目前尚缺乏新生兒快速、特異、有效的早期診斷指標(biāo)，因此對(duì)新生兒感染易感性的預(yù)測(cè)指標(biāo)的研究具有重要的意義。傳統(tǒng)理論認(rèn)為新生兒對(duì)感染的易感性，是由于新生兒尤其是早產(chǎn)兒機(jī)體發(fā)育不成熟，特異性與

2、非特異性免疫功能低下，容易受到病毒、細(xì)菌、真菌等侵犯引起新生兒感染性疾病。然而，這種免疫功能低下的個(gè)體差異大，且有賴(lài)于激發(fā)環(huán)境。這種相互矛盾的觀點(diǎn)呼喚一個(gè)更有特異性的解釋來(lái)說(shuō)明新生兒免疫力低下的原因。目前，有研究發(fā)現(xiàn)新生小鼠和人臍帶血生理性CD71+紅細(xì)胞增加有免疫抑制效應(yīng)；成人細(xì)胞在輸入新生小鼠體內(nèi)，或者與新生兒脾細(xì)胞共培養(yǎng)后，其固有免疫保護(hù)因子的分泌減少。CD71即轉(zhuǎn)鐵蛋白受體，是一種胎兒紅細(xì)胞膜抗原，存在于早期紅細(xì)胞、單核細(xì)胞和激

3、活的淋巴細(xì)胞上，但不存在于成熟的紅細(xì)胞上。在原始有核紅細(xì)胞，CD71表達(dá)很弱或者檢測(cè)不到，而在終末有核紅細(xì)胞上陽(yáng)性檢出率可達(dá)100%。在新生小鼠除去CD71+細(xì)胞，或者隨著新生兒生后生長(zhǎng)發(fā)育而減少的CD71+細(xì)胞數(shù)目，均與其免疫抑制效應(yīng)的丟失和在圍生期抵抗李斯特菌和大腸桿菌的能力的保存呈平行關(guān)系。根據(jù)國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀，本項(xiàng)目組對(duì)新生兒感染與CD71+紅細(xì)胞的關(guān)系提出假設(shè)：新生兒感染的易感性與臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量相關(guān)。為了論證該假

4、設(shè)，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)孕婦分娩時(shí)臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量，并跟蹤隨訪分娩新生兒1個(gè)月，收集相關(guān)臨床資料，分析臍帶血中CD71+紅細(xì)胞含量與新生兒感染發(fā)生的關(guān)系，從而明確臍帶血中CD71+紅細(xì)胞含量對(duì)新生兒感染的預(yù)測(cè)作用及其臨床意義。
　　方法：
　　1）標(biāo)本來(lái)源：2014年7月1日至2014年12月31日在汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院分娩的孕婦的臍帶血標(biāo)本。
　　2）入組標(biāo)準(zhǔn)：分娩孕婦年齡大于18歲；孕婦分

5、娩前無(wú)感染病史；孕婦分娩前未使用抗生素；無(wú)腫瘤、高血壓、心臟病、糖尿病等嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病。
　　3）臨床資料的收集：收集分娩孕婦及新生兒的相關(guān)臨床資料，收集內(nèi)容見(jiàn)附件表格。
　　4）病例隨訪：所有入組病例隨訪新生兒1個(gè)月，每1周電話隨訪1次，記錄新生兒發(fā)生感染的情況及預(yù)后。
　　5）標(biāo)本的前期處理：收集本院分娩的孕母臍帶血6ml，分別留置在帶有抗凝劑的真空管中；采用1700轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，分離出血漿，保存于-70℃；

6、分離血漿后，將用Ficoll-Hypaque梯度液加入剩余的血液中，3500轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，分離出紅細(xì)胞和白細(xì)胞，取紅細(xì)胞液（每6ml臍帶血中約能分離出2ml紅細(xì)胞液），采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)CD71+紅細(xì)胞含量。
　　6）項(xiàng)目研究人員的分工和研究過(guò)程中的盲法
　　7）采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行臨床資料及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析；CD71+紅細(xì)胞含量、孕母及新生兒的臨床資料和新生兒在1個(gè)月內(nèi)發(fā)生感染的情況等資料采用非參數(shù)檢

7、驗(yàn)；采用Logistic回歸模型對(duì)影響新生兒在1個(gè)月內(nèi)發(fā)生感染的情況的因素進(jìn)行多因素綜合分析；設(shè)定P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)有87例新生兒進(jìn)入分析,其中發(fā)生感染18例(新生兒敗血癥9例，新生兒肺炎7例,結(jié)膜炎1例,膿皰疹1例),未發(fā)生感染69例。所有新生兒中男性48名,女性39名；早產(chǎn)兒42名,足月兒45名；住新生兒科28例，未住新生兒科59例；使用抗生素18例，未使用抗生素

8、69例。
　　2、發(fā)生感染與未發(fā)生感染的新生兒的CD71+紅細(xì)胞比率和CRP的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；WBC差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)(t=0.62，P=0.641)。
　　3、CD71+紅細(xì)胞比率按小于5.0%,大于5.0%分為陰性與陽(yáng)性，CRP按小于8mg/L，大于8mg/L分為陰性與陽(yáng)性。在全部研究對(duì)象和發(fā)生感染的新生兒中，CD71+紅細(xì)胞比率診斷感染的陽(yáng)性率較CRP高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CRP與CD71+紅細(xì)胞比率診斷感

9、染的特異度和靈敏度的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CD71+紅細(xì)胞比率的特異度和靈敏度均高于CRP，而兩者的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　5、CD71+紅細(xì)胞比率陽(yáng)性(大于5.0%)與抗生素使用存在關(guān)聯(lián)性,關(guān)聯(lián)性大小為r=0.82,P=0.000,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　6、性別、出生體重對(duì)CD71+紅細(xì)胞比率無(wú)影響,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；出生胎齡和胎膜早破對(duì)CD71+紅細(xì)胞比率有

10、影響,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　7、logistic回歸分析顯示出生胎齡和母體胎膜早破對(duì)新生兒出生時(shí)臍帶血中CD71+紅細(xì)胞比率均有影響?；貧w方程的方差分析X2=64.931,P=0.000，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,決定系數(shù)R2=0.343，復(fù)相關(guān)系數(shù)R=0.59,回歸方程擬合度為43.7%。
　　結(jié)論：
　　1）新生兒出生時(shí)，臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量與新生兒感染的發(fā)生率呈正相關(guān)，可作為新生兒感染的早期預(yù)測(cè)指