替米沙坦對大鼠急性心肌梗死Cx43及TNF-α的影響.pdf

1、背景與目的:
　　 經(jīng)濟(jì)發(fā)展及生活水平與方式的改變導(dǎo)致心血管系統(tǒng)疾病發(fā)病率逐年增加。心肌梗死(myocardial infarction，MI)屬于冠心病的一種嚴(yán)重類型，其中急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)的死亡率最高，己成為嚴(yán)重威脅人們生命的疾病之一。急性心肌梗死早期常發(fā)生心律失常，其中室性心律失常是常見的致死性心律失常，其發(fā)生機(jī)理至今仍不十分清楚。
　　 近年來研究表明，

2、心肌縫隙連接蛋白43(connexin43，Cx43)的表達(dá)與分布的異?？梢鹂p隙連接結(jié)構(gòu)功能的異常，這與心律失常的發(fā)生以及持續(xù)具有密切的關(guān)系?？p隙連接蛋白的降解與分布的異?？梢鹦墓：蟮氖倚孕穆墒С?。有研究表明血管緊張素-Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)增多可能導(dǎo)致Cx43表達(dá)的下降，而AngⅡ受體阻滯劑可上調(diào)心肌梗死大鼠Cx43的表達(dá)、改善心肌梗死后Cx43的重構(gòu)，但具體機(jī)制還缺少實(shí)驗(yàn)證據(jù)。人們也發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死時腫瘤壞死因

3、子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)在心臟的過度表達(dá)可引起小鼠心肌細(xì)胞的電重構(gòu)，可導(dǎo)致室性心律失常的發(fā)生；而且發(fā)現(xiàn)TNF-α可通過激活JNK(Jun N-terminal kinase)信號系統(tǒng)來抑制Cx43基因的表達(dá)從而抑制由縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(Gap junction intercellular communication，GJIC)的功能。
　　 隨著學(xué)者的進(jìn)一步研究，認(rèn)為藥物可影響心

4、肌縫隙連接結(jié)構(gòu)與分布，是抗心律失常治療研究的一個新領(lǐng)域。替米沙坦是一種血管緊張素-Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)受體-1(AT1)的拮抗劑，具有改善內(nèi)皮功能、逆轉(zhuǎn)動脈粥樣硬化和改善心肌重塑及心功能的作用。國內(nèi)外目前尚無血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(AngiotensinⅡ receptor blocker，ARB)類藥物影響心梗后Cx43重構(gòu)及TNF-α的表達(dá)的相關(guān)研究報道。
　　 本研究以建立心肌梗死大鼠模型為研究對象，通

5、過免疫組織化學(xué)方法，觀察急性心肌梗死大鼠心肌縫隙連接蛋白43(connexin43，Cx43)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)，分析二者之間相互變化關(guān)系。以及替米沙坦對急性心肌梗死大鼠心肌縫隙連接蛋白43和腫瘤壞死因子-α的影響；并初步探討替米沙坦防治急性心肌梗死時心律失常的作用及其可能機(jī)制，為ARB類藥物防治AMI后致命性心律失常提供理論依據(jù)。
　　 材料和方法:
　　 1、實(shí)驗(yàn)動物與分組
　　 選取健康

6、成年雄性SD大鼠，16周齡，體重220g～250g。實(shí)驗(yàn)大鼠由鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，實(shí)驗(yàn)動物合格證號410116。實(shí)驗(yàn)動物中心室內(nèi)通風(fēng)良好，光照時間12h/d，室溫保持在18℃～25℃，不限制飲食、飲水。將27只大鼠隨機(jī)分為三組(每組9只)：假手術(shù)組、急性心肌梗死組(模型組)、替米沙坦+急性心肌梗死組(替米沙坦組)。
　　 2、實(shí)驗(yàn)方法與檢測指標(biāo)
　　 大鼠經(jīng)稱重后用水合氯醛溶液腹腔注射麻醉，在全麻下行結(jié)扎左冠狀動脈

7、造成大鼠心肌梗死模型。HE染色觀察心肌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化；采用免疫細(xì)胞化學(xué)法顯示急性心肌梗死區(qū)、邊緣帶及非缺血區(qū)Cx43及TNF-α表達(dá)的分布。應(yīng)用德國Lecia顯微照像系統(tǒng)及上海山富科學(xué)儀器有限公司的Biosens DigitalImaging Systems v1.6，進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)圖象分析。
　　 3、統(tǒng)計學(xué)方法:
　　 結(jié)果計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行處理，各組均數(shù)間比較檢

8、驗(yàn)方法采用單因素方差分析(F檢驗(yàn))，組間兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)均取α=0.05。
　　 結(jié)果:
　　 1、心肌組織形態(tài)學(xué)變化：與假手術(shù)組相比模型組梗死區(qū)心肌細(xì)胞大面積壞死并由廣泛增生的膠原纖維組織代替，非梗死區(qū)心肌細(xì)胞代償性肥大，排列紊亂，間質(zhì)可見明顯膠原增生，有炎性細(xì)胞浸潤；替米沙坦干預(yù)組心肌細(xì)胞體積、心肌纖維增粗較模型組減輕，心肌纖維排列相對整齊，間質(zhì)膠原增生及炎性細(xì)胞浸潤較模型組減輕。
　　 2

9、、Cx43的表達(dá)：與假手術(shù)組相比模型組Cx43排列紊亂，Cx43表達(dá)的平均光密度值、陽性表達(dá)面積和積分光密度均顯著降低(P<0.05)，提示心肌梗死后Cx43的表達(dá)受到不同程度的損傷；替米沙坦組Cx43平均光密度值和積分光密度均顯著高于模型組(P<0.05)。
　　 3、TNF-α的表達(dá)：與假手術(shù)組相比模型組TNF-α表達(dá)顯著增高(P<0.05)；替米沙坦組TNF-α平均光密度值和積分光密度均顯著低于模型組(P<0.05)，提示