丹皮酚及氧化苦參堿對RBL-2H3細胞活化脫顆粒的影響.pdf

1、湖北中醫(yī)學院碩士學位論文丹皮酚及氧化苦參堿對RBL2H3細胞活化脫顆粒的影響姓名：周國茂申請學位級別：碩士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床指導教師：高進200504012002級科研型碩士畢業(yè)論文丹皮酚和氧化苦參堿對RBL2H3肥大細胞活化脫顆粒的影響研究生周國茂導師高進中文摘要目的:通過建立體外抑制MC脫顆粒的藥效學模型，從MC的角度探討Pae及Oxy的抗I型變態(tài)反應作用機制。方法:一，用MTT比色法檢測不同濃度的Pae和Oxy對RBL2H3細胞

2、活化的影響，并求出ICS。值。二，建立體外抑制RBL2113細胞脫顆粒的藥效學模型。取對數(shù)生長的RBL2H3細胞，以C4880刺激細胞活化脫顆粒，分別檢測Omin5min15min30minlh分泌組胺的量和Omin5min15min30min1h2h4h8h16h24h分泌TNFa的量。三，根據(jù)MTT比色法分別選擇Pae和Oxy5個不同的實驗濃度，并以色甘酸鈉作為陽性對照。以C4880刺激RBL2H3細胞活化脫顆粒，測不同濃度藥物對R

3、BL2H3細胞分泌組胺及TNFa變化。結(jié)果:一，Pae在濃度(mgml)為0.0250.050.10.20.4時，對RBL2H3細胞的增值抑制率(%)各為13.5219.6436.2252.04123.47IC、值為0.2200mgmlOxy為0.2mgml0.4mgml0.8mgml1.6mgml3.2mgml時，對RBL2H3細胞的增值抑制率(%)各為一4.7632.7038.4150.7960.40ICS。值為0.9454mgml

4、。二，C48801011gml刺激RBL2H3細胞活化脫顆粒，分泌組胺的釋放率(%)分別為:Omi。為6.54士0.725min為12.17士1.4215min為17.34士0.8630min為23.14士1.0160min為26.24士2.23不同時間分泌TNFa的量(pgml)分別為:Omin為20.98士1.275min為32.92士3.46、為15min為37.15士2.9730min為36.58士5.251h為67.65士5.

5、332h為47.63士15.524h為14.22士6.146h為23.32士2.838h為8.08士2.6924h為8.84士0.570三，根據(jù)RBL2H3細胞活化脫顆粒，分泌組胺及TNFa動力學變化，可推測，RBL2H3細胞活化脫顆粒分泌組胺的高峰大約在30min，分泌TNFa大約在lh.因此，選擇30min檢測RBL2H3細胞活化脫顆粒組胺的分泌的量，選擇60min檢測RBL2H3細胞活化脫顆粒TNFa的分泌的量。根據(jù)MTT比色法選

6、擇Pae和Oxy5個不同的實驗濃度分別為:Pae的5個濃度(mgml)為101011010`10sOxy5個濃度(mgml)為101101021010。以色甘酸鈉(0.lmgml0.5mgml)為對照。各種不同濃度的藥物先與細胞預培養(yǎng)60min后，加入C488010ugml刺激RBL2H3細胞活化。結(jié)果Pae的5個濃度對RBL2H3細胞活化脫顆粒組胺的釋放抑制率(%)各為:色甘酸鈉0.lmg加1為36.55土1.780.5mg加1為55

7、.01士1.18Pae10mgml為73.93士1一6710mgml為57.55土3.1810一，mgml為35.18士3.6510mgml為15.01士1.6710mgml為6.68士2.94.Oxy100mgml為67.76士2.93、10一【mgml為42.47士2.7710一’mgml為33.49士2.8510mgml為18.35士1.0710一‘mgml為9.09土2.79Pae10mgml10mgml抑制RBL2H3細胞釋放