甘草查爾酮異甘草素的化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾及抗宮頸癌活性研究.pdf

1、目的:建立一種快速鑒別脹果甘草品種的簡(jiǎn)便方法;以甘草查爾酮類化合物異甘草素（Isoliquiritigenin，ILG）為先導(dǎo)化合物，對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行化學(xué)修飾制備目標(biāo)化合物，并考查對(duì)抗人子宮頸癌活性的研究。
　　方法:(1)以脹果甘草中的特殊黃酮類成分甘草查爾酮A為對(duì)照品，采用薄層色譜法鑒別脹果甘草品種的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行鑒定。(2)采用酸性催化法、羥基保護(hù)法和微波固相合成法等三種方法對(duì)異甘草素衍生物3-甲氧基異甘草素(3-MO-ILG)進(jìn)

2、行人工全合成，然后選擇一種產(chǎn)率較高的合成方法——微波固相合成法，合成其余的目標(biāo)化合物。(3)以人子宮頸癌SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞為體外抗癌實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停耘R床常用的化療藥順鉑作為陽(yáng)性對(duì)照組，利用目標(biāo)化合物對(duì)SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞分別進(jìn)行24 h、48 h和72 h的藥物干預(yù);采用MTT法測(cè)定其對(duì)子宮頸癌SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞增殖抑制率，篩選出具有生物活性較強(qiáng)的候選藥物;采用流式細(xì)胞儀法測(cè)定促進(jìn)子宮頸癌細(xì)胞凋亡作用;最后進(jìn)行構(gòu)效關(guān)系

3、的分析。
　　結(jié)果:(1)根據(jù)薄層鑒定結(jié)果可觀察到，不同產(chǎn)地的脹果甘草乙醇提取物中都具有符合于甘草查爾酮A的1個(gè)亮黃色熒光斑點(diǎn)。經(jīng)制備薄層法分離純化并重結(jié)晶后獲得其與對(duì)照品相似的亮黃色針狀結(jié)晶，經(jīng)理化鑒定和光譜鑒定后甘草查爾酮A。(2)通過酸性催化法、羥基保護(hù)法和微波固相合成法制備3-甲氧基異甘草素的產(chǎn)率為8.9％、9.27％和57.60％。選擇了一種產(chǎn)率較高的方法——微波固相合成法，利用此方法合成異甘草素、3，4'-二羥基-4-

4、甲氧基查爾酮、3-羥基異甘草素、4，4'-二羥基查爾酮的產(chǎn)率分別為58.9％、52.9％、48.89％、38.75％。(3)利用MTT法測(cè)定SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞增殖抑制率，研究結(jié)果顯示，在濃度為12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml和200μg/ml的范圍之間，目標(biāo)化合物對(duì)SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞干預(yù)24 h、48h和72 h的抑制率分別約為10％～50％、20％～70％和40％～

5、80％，具有濃度依賴性和時(shí)間依賴性。(4)篩選出具有較強(qiáng)生物活性的目標(biāo)化合物——異甘草素、3-甲氧基異甘草素、3-羥基異甘草素和3,4'-二羥基-4-甲氧基查爾酮，再用流式細(xì)胞儀法測(cè)定其對(duì)SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞的凋亡作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在100μg/ml濃度下，它們對(duì)SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞的凋亡率為＞30％，具有明顯的促凋亡作用。
　　結(jié)論:(1)薄層色譜法是簡(jiǎn)便快速鑒定脹果甘草品種的一種有效鑒定方法，為脹果甘草的快速品種