甘草查爾酮類衍生物的合成及抗宮頸癌活性研究.pdf

1、目的：a.設(shè)計并合成查爾酮異甘草素類化合物；b.設(shè)計并合成含氟查爾酮異甘草素類化合物；c.對在間苯二酚中的Mannich反應(yīng)應(yīng)用的擴展，并利用Mannich反應(yīng)合成查爾酮異甘草素Mannich堿類化合物；d.對上述三類化合物分別評價其對抑制子宮頸癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖和促癌細(xì)胞凋亡作用；e.結(jié)合優(yōu)勢基團合成目標(biāo)化合物XVII，對目標(biāo)化合物評價其抗宮頸癌細(xì)胞活性。
　　方法：a.利用Claisen-Schmidt反應(yīng)原理，通過微波固相合成

2、5種目標(biāo)化合物(I-V)，并進行結(jié)構(gòu)表征；b.利用經(jīng)典Claisen-Schmidt反應(yīng)，在低溫、堿性條件下合成7種目標(biāo)化合物(VI-XII)，并進行結(jié)構(gòu)表征；c.以間苯二酚、甲醛為原料、以兩種含氮的化合物(叔丁胺和吡咯烷)為胺類物質(zhì)，探索間苯二酚 Mannich反應(yīng)的最佳條件；并利用異甘草素中的間苯二酚結(jié)構(gòu)進行Mannich反應(yīng)，以醋酸為溶媒，濃鹽酸作催化劑的條件下合成4種含氮的Mannich堿的目標(biāo)化合物(XIII-XVI)；d.以

3、 SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞)和HeLa(子宮頸癌細(xì)胞)細(xì)胞株作為體外模型，利用MTT法考察目標(biāo)化合物對宮頸癌細(xì)胞增殖的抑制活性，然后利用流式細(xì)胞儀測定目標(biāo)化合物對宮頸癌細(xì)胞促凋亡作用。e.通過對三類物質(zhì)的抗癌活性研究對比，合成最終化合物 XVII，利用MTT法考察目標(biāo)化合物對宮頸癌細(xì)胞增殖的抑制活性，然后利用流式細(xì)胞儀測定目標(biāo)化合物對宮頸癌細(xì)胞促凋亡作用。
　　結(jié)果：a.快速高效合成了5個查爾酮異甘草素類化合物，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H-N

4、MR，13C-NMR譜確認(rèn)，產(chǎn)率在38.75％~58.9%；b.在較溫和的條件下合成7個含氟查爾酮異甘草素類化合物，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H-NMR譜確認(rèn)，產(chǎn)率在23.5%~45.2%；c.間苯二酚的Mannich反應(yīng)得到證明；并在間苯二酚Mnanich反應(yīng)的基礎(chǔ)上合成4個異甘草素類化合物，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H-NMR譜確認(rèn)，產(chǎn)率在7.5%~12.6%；d.在第一類化合物I-V中，對SiHa細(xì)胞的IC50在0.082~75.21μg·mL-1，對HeLa細(xì)

5、胞的IC50在6.87~62.4μg·mL-1，IC50以化合物IV在對SiHa細(xì)胞干預(yù)72 h為最低，0.082μg·mL-1，在對HeLa細(xì)胞干預(yù)72 h為最低，6.87μg·mL-1；流式細(xì)胞儀的結(jié)果為，對SiHa細(xì)胞的總凋亡率在8.4%~43.6%，對HeLa細(xì)胞的總凋亡率在6.87%~62.4%；以化合物I，在濃度為100μg·mL-1對SiHa細(xì)胞的總凋亡率最高，43.6%，以化合物II，在濃度為25μg·mL-1對HeLa

6、細(xì)胞的總凋亡率最高，92.3%。在第二類化合物VI-XII中，對SiHa細(xì)胞的IC50在3.35~25.21μg·mL-1，對HeLa細(xì)胞的IC50在10.25~42.54μg·mL-1，IC50以化合物VII在對SiHa細(xì)胞干預(yù)72 h為最低，3.35μg·mL-1，以化合物VII在對HeLa細(xì)胞干預(yù)72 h為最低，10.25μg·mL-1；在第三類化合物XIII-XVI中，對SiHa細(xì)胞的IC50在2.36~15.35μg·mL-1

7、，對HeLa細(xì)胞的IC50在1.36~23.35μg·mL-1，IC50以化合物XV在對SiHa細(xì)胞干預(yù)72 h為最低，2.36μg·mL-1，以化合物XV在對HeLa細(xì)胞干預(yù)72 h為最低，6.87μg·mL-1。e.通過對三類物質(zhì)的抗癌活性研究對比，合成最終化合物XVII，并計算其IC50，然后利用流式細(xì)胞儀測定目標(biāo)化合物對宮頸癌細(xì)胞促凋亡作用。
　　結(jié)論：通過三類不同的合成途徑合成三類甘草查爾酮類化合物，并且對其目標(biāo)化合物進