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文檔簡介
1、目的:檢測不明原因病毒性腦炎(VE)患者外周血單個核細胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中博爾納病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,探討不明原因的病毒性腦炎患者與BDV感染的關(guān)系及BDV陽性患者的臨床特征。 方法:1、根據(jù)BDV p24基因序列,設(shè)計并合成引物和熒光標記探針。以陽性質(zhì)粒做陽性模板,用于標準曲線的制定和樣品檢測,建立檢測BDV的FQ-
2、nRT-PCR方法。 2、用已建立的FQ-nRT-PCR方法檢測52份不明原因的病毒性腦炎患者和30例健康外周血單個核細胞(PBMCs)中BDV p24基因片段。同時用β-肌動蛋白(β-actin)作為內(nèi)參照,并對陽性產(chǎn)物進行測序分析和總結(jié)陽性患者的臨床特征。 結(jié)果:52例病毒性腦炎PBMCs標本BDV p24基因片段FQ-nRT-PCR檢出率13.46%(7/52,拷貝數(shù)>102kb/μl。對照組30例正常體檢者均為陰
3、性(0%,0/30),經(jīng)比較兩者間陽性率有顯著性差異(P<0.05)。PBMCs所含目的基因片段陽性產(chǎn)物測序后,與BDV標準病毒株V和馬源的BDV病毒株H1766序列比較同源性分別為95.35%和98.84%。在4個位點出現(xiàn)基因突變(nt1649 T→C,nt1656 G→A,nt1670 C→T,nt1676C→T)。該目的基因片段與馬源的BDV病毒株親緣關(guān)系最近。BDV p24陽性腦炎患者主要以精神行為異常為臨床特征。 結(jié)論
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