5-HT2AR-783A-G遺傳多態(tài)性對(duì)5-HT2A受體基因轉(zhuǎn)錄活性的影響.pdf

1、背景：非典型性抗精神病藥物在全球廣泛使用，5-HT2A受體為非典型性抗精神病藥物(APS)的主要作用耙點(diǎn)。5-HT2AR基因調(diào)控區(qū)存在-1438A/G多態(tài)性，證明該突變A等位基因可顯著提高5-HT2ARmRNA的轉(zhuǎn)錄活性，且證明-1438G/G與精神分裂癥患者腦中5-HT2AR受體降低或缺失有關(guān)。在5-HT2AR基因的高活性調(diào)控區(qū)存在-783A/G突變，但至今，國(guó)內(nèi)外仍未見(jiàn)該基因多態(tài)對(duì)5-HT2AR基因轉(zhuǎn)錄活性影響的報(bào)道。
　　

2、 目的：本課題通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)，建立5-HT2AR-783A/G野生型和突變等位基因的TK-PGL4.17重組試驗(yàn)質(zhì)粒，在細(xì)胞水平研究5-HT2AR-783A/G的突變對(duì)5-HT2AR基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響。
　　 方法：構(gòu)建TK-PGL4.17-5-HT2AR-783AA和TK-PGL4.17-5-HT2AR-783GG的螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因重組試驗(yàn)質(zhì)粒，海腎熒光素酶報(bào)告基因(PRL-TK)作為內(nèi)參質(zhì)粒校正轉(zhuǎn)染效率，試驗(yàn)質(zhì)粒與

3、內(nèi)參質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞和入神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(IMR-32)，轉(zhuǎn)染48小時(shí)后裂解細(xì)胞，用雙報(bào)告基因熒光檢測(cè)試劑盒在自發(fā)光檢測(cè)儀上檢測(cè)熒光素酶活性，以螢火蟲(chóng)熒光與海腎熒光的比值反應(yīng)不同基因型插入片斷的轉(zhuǎn)錄活性，并比較組間差異。
　　 結(jié)果：在Hela細(xì)胞系的研究表明5-HT2AR-783A/G基因多態(tài)性顯著影響5-HT2AR基因的轉(zhuǎn)錄活性，-783A/A野生型對(duì)轉(zhuǎn)錄活性的影響(101.60±39.24)高于-783G/G突變型(