Akt和PEA-15在缺血后處理對(duì)抗全腦缺血再灌注損傷中的作用研究.pdf

1、目的;缺血后處理(ischemic postconditioning，IPost)能夠減輕腦缺血再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)誘導(dǎo)的神經(jīng)功能損傷，是一種內(nèi)源性保護(hù)腦缺血的新方法，但其保護(hù)機(jī)制尚不清楚。本研究旨在探索缺血后處理神經(jīng)保護(hù)作用的分子機(jī)制，為治療缺血性腦損傷提供新的思路。
　　方法:采用四動(dòng)脈結(jié)扎(4-VO)法，雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠全腦缺血15min作為全腦缺血/再灌注損

2、傷模型;在全腦缺血15min后的再灌注期內(nèi)施行短暫全腦缺血3min作為缺血后處理。
　　第一部分Akt的選擇性抑制劑Akt inhibitorⅣ在缺血后2h進(jìn)行側(cè)腦室注射。應(yīng)用尼氏染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的存活情況，采用免疫沉淀和免疫印跡檢測(cè)蛋白質(zhì)的相互作用和表達(dá)。
　　第二部分PEA-15 siRNA于缺血后1h定位注射至海馬。應(yīng)用尼氏染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的存活情況，采用免疫印跡方法檢測(cè)蛋白質(zhì)的表達(dá)。
　　結(jié)

3、果:第一部分1.Akt抑制劑Akt inhibitorⅣ消除了缺血后處理對(duì)全腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。2.Akt抑制劑Akt inhibitorⅣ消除了缺血后處理對(duì)Gluk2-PSD-95-MLK3信號(hào)復(fù)合體的抑制作用。3.Akt抑制劑Akt inhibitorⅣ解除了缺血后處理對(duì)MLK3-JNK3信號(hào)通路的抑制作用。
　　第二部分1.缺血后處理顯著提高了全腦缺血再灌注24h大鼠海馬CA1區(qū)PEA-15的表達(dá)水平。2.缺血后處理

4、改變了由全腦缺血再灌注引起的PEA-15的表達(dá)變化。3.PEA-15 siRNA消除了缺血后處理對(duì)全腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
　　結(jié)論:第一部分1.缺血后處理的神經(jīng)保護(hù)作用是通過(guò)激活A(yù)kt來(lái)實(shí)現(xiàn)的。2.在缺血后處理過(guò)程中，激活的Akt通過(guò)抑制Gluk2-PSD-95-MLK3-JNK3信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
　　第二部分1.缺血后處理能夠調(diào)控全腦缺血再灌注損傷對(duì)PEA-15表達(dá)的影響。2.PEA-15介導(dǎo)缺血后處理