Akt和PEA-15在缺血后處理對抗全腦缺血再灌注損傷中的作用研究.pdf

1、目的;缺血后處理(ischemic postconditioning，IPost)能夠減輕腦缺血再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)誘導的神經(jīng)功能損傷，是一種內(nèi)源性保護腦缺血的新方法，但其保護機制尚不清楚。本研究旨在探索缺血后處理神經(jīng)保護作用的分子機制，為治療缺血性腦損傷提供新的思路。
　　方法:采用四動脈結扎(4-VO)法，雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠全腦缺血15min作為全腦缺血/再灌注損

2、傷模型;在全腦缺血15min后的再灌注期內(nèi)施行短暫全腦缺血3min作為缺血后處理。
　　第一部分Akt的選擇性抑制劑Akt inhibitorⅣ在缺血后2h進行側(cè)腦室注射。應用尼氏染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的存活情況，采用免疫沉淀和免疫印跡檢測蛋白質(zhì)的相互作用和表達。
　　第二部分PEA-15 siRNA于缺血后1h定位注射至海馬。應用尼氏染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的存活情況，采用免疫印跡方法檢測蛋白質(zhì)的表達。
　　結

3、果:第一部分1.Akt抑制劑Akt inhibitorⅣ消除了缺血后處理對全腦缺血再灌注損傷的保護作用。2.Akt抑制劑Akt inhibitorⅣ消除了缺血后處理對Gluk2-PSD-95-MLK3信號復合體的抑制作用。3.Akt抑制劑Akt inhibitorⅣ解除了缺血后處理對MLK3-JNK3信號通路的抑制作用。
　　第二部分1.缺血后處理顯著提高了全腦缺血再灌注24h大鼠海馬CA1區(qū)PEA-15的表達水平。2.缺血后處理

4、改變了由全腦缺血再灌注引起的PEA-15的表達變化。3.PEA-15 siRNA消除了缺血后處理對全腦缺血再灌注損傷的保護作用。
　　結論:第一部分1.缺血后處理的神經(jīng)保護作用是通過激活Akt來實現(xiàn)的。2.在缺血后處理過程中，激活的Akt通過抑制Gluk2-PSD-95-MLK3-JNK3信號通路來發(fā)揮神經(jīng)保護作用。
　　第二部分1.缺血后處理能夠調(diào)控全腦缺血再灌注損傷對PEA-15表達的影響。2.PEA-15介導缺血后處理