T-bet基因及其與胃癌關(guān)系的研究.pdf

1、江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文Tbet基因及其與胃癌關(guān)系的研究姓名：邱谷風(fēng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：許化溪20070301江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文中的表達(dá)。采用DHPLC方法檢測(cè)Tbet外顯子上基因的突變點(diǎn)。采用DHPLC及基因測(cè)序方法檢測(cè)Tbet外顯子上基因的突變點(diǎn)。結(jié)果55例胃癌患者Tbet、GATA3、IFN—Y、IL一4的表達(dá)率依次為51％(28／55)、78％(43／55)、27％(15／55)、69％(38／55)。

2、定量PCR結(jié)果顯示，病人組的Tbet和IFN—Y明顯低于正常對(duì)照組(po01)，而GATA3和IL一4則明顯高于正常對(duì)照組(p001)。Tbet與lFN一1，在病人體內(nèi)的mRNA表達(dá)存在正相關(guān)性(pO01)，健康人則否。GATA3與IL4的表達(dá)在兩組中均呈明顯正相關(guān)(pO01和p005)，且在P53陽(yáng)性的患者中，Tbet的表達(dá)率較低，而GATA3的表達(dá)率較高。獲得含有Tbet的重組腺相關(guān)病毒，將其感染SGC后，約40％一50％的細(xì)胞出現(xiàn)

3、綠色熒光。對(duì)被感染細(xì)胞進(jìn)行RTPCR，擴(kuò)增出1670bp的Tbet及388bp的IFN7目的條帶，通過(guò)Westernblot也檢測(cè)到被感染的細(xì)胞中Tbet及IFNq蛋白的表達(dá)。DHPLC檢測(cè)并通過(guò)測(cè)序發(fā)現(xiàn)Tbet的第一外顯子的第310位出現(xiàn)(G／C)顛換其檢出率為75％，第六外顯子第550位出現(xiàn)(G／A)轉(zhuǎn)換檢出率為125％。結(jié)論胃癌患者有明顯Th2漂移現(xiàn)象，且P53的表達(dá)與Tbet的表達(dá)呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，說(shuō)明在胃癌患者體內(nèi)Tbet表達(dá)頻率的