反義CD151基因抑制血管損傷后內(nèi)膜增生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的 觀察反義CD151基因局部轉(zhuǎn)染對(duì)血管損傷后內(nèi)膜增生的效果，以探討基因療法防治再狹窄的新靶點(diǎn)。 方法 雄性SD大鼠(350-400克)60只，15只大鼠用于動(dòng)態(tài)觀察血管損傷局部病理演變，其余45只隨機(jī)分入三組，分別為基因治療組(15只)，載體對(duì)照組(15只)和生理鹽水(NS)對(duì)照組15只，以NS組對(duì)側(cè)頸動(dòng)脈標(biāo)本作為空白對(duì)照組；建立大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷模型，采用血管腔內(nèi)保留灌注和血管外膜滲透兩種途徑，在基因治療組

2、大鼠的球囊損傷血管局部轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-anti-CD151重組質(zhì)粒+脂質(zhì)體(Lipofectamine)復(fù)合物；載體對(duì)照組轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)+脂質(zhì)體復(fù)合物；NS對(duì)照組局部給予相同體積的NS，空白對(duì)照組行球囊損傷，術(shù)后均正常飼養(yǎng)。取術(shù)后14天和28天時(shí)的造模血管標(biāo)本，以免疫組化方法分析CDl51蛋白的組織形態(tài)表達(dá)：取28天時(shí)的造模血管標(biāo)本，以HE染色觀察形態(tài)學(xué)變化，測(cè)算管腔面積(LA)、內(nèi)膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)、內(nèi)

3、膜面積(IA)、中膜面積(MA)以及IA/MA比。 結(jié)果 免疫組化病理切片見14天后CD151陽(yáng)性染色主要分布在內(nèi)膜的血管平滑肌細(xì)胞表面，基因治療組、載體對(duì)照組和NS對(duì)照組血管CD151表達(dá)均較正常對(duì)照組血管增強(qiáng)，基因治療組的CD151陽(yáng)性染色明顯弱于載體對(duì)照組和NS對(duì)照組；28天后各組標(biāo)本中CD151陽(yáng)性染色均較14天組有所減弱，在血管內(nèi)膜、中膜和外膜分布無明顯差別。HE染色病理切片顯示，28天時(shí)基因治療組的LA、IT