CD151激活C-Met信號通路促HUVECs血管生成機制的研究.pdf

1、研究目的:CD151具有促進細胞增殖，分化及血管新生的作用。在既往的關于CD151促進體內外血管生成的研究基礎上，進一步探討其促進HUVECs血管生成的機制以及與C-Met，F(xiàn)AK信號通路的關系，闡明CD151在促HUVECs血管生成的作用以及對C-Met相關信號通路的影響。
　　研究方法：1.體外構建pAAV-CD151重組質粒，pAAV-GFP質粒作對照；設計siRNA-CD151和siRNA-Control,Lipo2000

2、轉染人臍靜脈內皮細胞，36小時后Western blotting鑒定各組CD151蛋白的表達；2 CCK8實驗檢測各組人臍靜脈內皮細胞的增殖能力；3.細胞粘附實驗評價各組人臍靜脈內皮細胞的粘附能力；4.Transwell實驗評價各組臍靜脈內皮細胞的遷移能力；5.一氧化氮檢測試劑盒檢測各組臍靜脈內皮細胞細胞上清中NO的含量；6.Elisa試劑盒檢測各組臍靜脈內皮細胞上清中VEGF含量；7.細胞信號傳導通路的研究：進一步探究CD151促進血

3、管生成的機制（C-Met相關信號通路）。
　　研究結果：1.Lipo2000成功轉染相關質粒和siRNA，實行對目的基因的表達調控；轉染36 h，pAAV-CD151組CD151蛋白的表達要高于pAAV-GFP組和siRNA-Control組;相對于siRNA-Control組，siRNA-CD151組CD151蛋白表達下降。2. CD151能夠明顯促進臍靜脈內皮細胞增殖；3.轉染24 h后，CD151組促進人臍靜脈內皮細胞的粘附

4、能力要高于其他各組；而這一作用在siRNA-CD151組被削弱。4. CD151能夠明顯促進人臍靜脈內皮細胞的遷移作用，而這一作用在siRNA-CD151組被削弱。5.人臍靜脈內皮細胞轉染后72 h,CD151能夠明促進人臍靜脈內皮細胞NO表達；6.人臍靜脈內皮細胞轉染后24 h,48 h和72 h，CD151能夠明顯促進人臍靜脈內皮細胞中VEGF表達。7. CD151表達增加后，C-Met磷酸化表達增加，這一作用在siRNA-CD15