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文檔簡介
1、目的: 初步探索Exosome體外抗HBV特異性免疫活性。 方法: 以細胞因子GM-CSF、IL-4及TNF-α培養(yǎng)健康人PBMC來源的DCs,通過流式細胞儀分析細胞表型判斷所收獲的DCs成熟度;采用多步驟離心法分離純化DCs培養(yǎng)上清中的Exosome,western blotting分析蛋白性質;以HBcAg刺激DCs,MTS法檢測收獲的HBcAg特異性DEXs刺激PBMC增殖的能力、ELISPOT法檢測HBc
2、Ag特異性DEXs刺激的PBMC產IFN-γ的能力。 結果: 成熟DC表面HLA-DR、CD80/CD86及CD83分子的表達水平明顯高于未成熟DC者(分別為45.3±8.3%vs 16.5±6.8%、90.2±6.5%/92.38±13.6%vs 6.3±4.5%/49.8±9.2%、83.53±10.8%vs 4.3±2.8%,P<0.05);成熟DCs分泌的Exosome表達HLA-DR、CD86分子也強于未成熟D
3、Cs分泌者;淋巴細胞增殖實驗結果顯示HBcAg特異性DEXs體外刺激PBMC增殖能力強于未成熟者(吸光度0.904±0.003 vs 0.545±0.010,P<0.001),但不如HBcAg特異性mDCs(0.904±0.003 vs 1.034±0.004,P<0.05);HBcAg特異性DEXs刺激的PBMC產IFN-γ能力強于未成熟者(斑點數32±13 vs 14±2,P<0.05),但也不如HBcAg特異性mDCs(32±13
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