抗PD-L1單抗聯(lián)合CTL對(duì)肺癌免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文抗PD-L1單抗聯(lián)合CTL對(duì)肺癌免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究姓名：包紅菊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（呼吸病學(xué)）指導(dǎo)教師：黃建安20100401中文摘要 抗P D ．L I 單抗聯(lián)合C T L 對(duì)肺癌免疫治療的實(shí)驗(yàn)研究基因的H 4 6 0 ／m o c k 細(xì)胞相比，H 4 6 0 ／P D ．L 1 細(xì)胞能抑制抗人C D 3 單抗( m A b ) 束U 激的T細(xì)胞增殖【( 0 ．7 0 3 4 - 0 ．0 1 4 )

2、V S ( O ．6 6 5 士0 ．0 1 4 ) ，P < 0 ．0 1 ] ；I F N 吖的分泌水平顯著下降[ ( 4 0 3 ．9 4 - 4 ．7 ) p g ／m lV S ( 1 1 8 ．74 - 7 ．4 ) p g ／m l ，P < O ．0 1 ] 。加入抗P D - L l 單抗后能阻斷P D ．L 1 信號(hào)對(duì)C D 3 單抗刺激的T 細(xì)胞增殖的負(fù)性作用【( 0 ．6 6 5 4 - 0 ．0 1

3、 4 ) V S( 0 ．6 9 0 4 - 0 ．0 1 7 ) ，P < 0 ．0 5 ] ，I F N 吖的分泌水平明顯上調(diào)[ ( 1 1 8 ．7 4 - 7 ．4 ) p g ／m l V S ( 4 0 1 ．0 4 -1 0 ．7 ) p g ／m l ，P < 0 ．0 1 ] 。結(jié)論：建立了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染P D ．L 1 基因的肺癌H 4 6 0 細(xì)胞株，該細(xì)胞株在體外對(duì)抗人C D 3 單抗刺激的T 細(xì)胞增殖和細(xì)

4、胞因子的分泌具有抑制作用，抗P D ．L 1 單抗能阻斷此負(fù)性作用。關(guān)鍵詞：P D ．L 1 ；T 細(xì)胞；H 4 6 0 細(xì)胞；肺癌第二部分 抗P D ．L 1 單抗聯(lián)合C T L 對(duì)裸鼠H 4 6 0 ／P D ．L 1 肺癌移植瘤治療作用的研究目的：建立人肺癌細(xì)胞株H 4 6 0 ／P D ．L 1 、H 4 6 0 ／m o c k 荷瘤裸鼠模型，抗P D ．L 1 單抗及過(guò)繼回輸肺癌抗原特異性C T L ，評(píng)價(jià)其體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)。

5、方法：常規(guī)方法從健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞中誘導(dǎo)樹(shù)突狀細(xì)胞( d e n d r i t i c c e l l s ，D C s ) ，采用凋亡腫瘤細(xì)胞負(fù)載D C s ，并利用激發(fā)型C D 4 0 單克隆抗體( C D 4 0 m A b ) 誘導(dǎo)D C s 成熟；成熟D C s 與自體T 細(xì)胞共育，獲得C T L ，流式細(xì)胞儀檢測(cè)C T L 細(xì)胞表型的變化；建立人肺癌細(xì)胞株H 4 6 0 ／P D ．L 1 、H 4 6 0 ／m o

6、c k 荷瘤裸鼠模型，應(yīng)用抗P D ．L 1 單抗聯(lián)合C T L 進(jìn)行免疫治療，評(píng)價(jià)其在體內(nèi)的抗腫瘤效應(yīng)。結(jié)果：凋亡腫瘤細(xì)胞負(fù)載聯(lián)合C D 4 0 單抗激發(fā)上調(diào)D C s 表面C D l a 、C D 8 0 、C D 8 3 、H L A —D R的表達(dá)；成熟D C s 和自體的T 細(xì)胞共育活化后C D 8 + T 細(xì)胞比例明顯上調(diào)；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，生理鹽水( N S ) 組，H 4 6 0 ／P D - L 1 組腫瘤體積較H 4 6

7、 0 ／m o c k 組腫瘤體積明顯增大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( 尸< O ．0 5 ) ；H 4 6 0 ／P D - L 1 組裸鼠出現(xiàn)右下側(cè)皮膚轉(zhuǎn)移和肝臟彌漫性轉(zhuǎn)移，在5 周內(nèi)全部死亡，生存時(shí)間明顯少于H 4 6 0 ／m o c k 組裸鼠( P < 0 ．0 1 ) ；C T L 可有效抑制裸鼠皮下移植瘤的生長(zhǎng)，對(duì)H 4 6 0 ／m o c k 組較H 4 6 0 ／P D - L 1 組抑瘤作用強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意