2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、目的:平滑肌細胞(Smooth muscle cells,SMCs)及內(nèi)皮祖細胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)相互影響,并在深靜脈血栓形成的機化再通中均起著重要的作用,本文建立SMCs與EPCs共培養(yǎng)模型,探討SMCs對EPCs增殖、分化及合成促血管生成因子和蛋白酶情況。
　　方法:1.密度梯度離心法獲取SD大鼠來源的骨髓單個核細胞(bone marrow-derived mononucle

2、ar cells,BMMNCs),差速貼壁法結(jié)合EPCs專用培養(yǎng)基(EGM-2MV)定向誘導(dǎo)培養(yǎng)EPCs,在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學(xué)特征,應(yīng)用免疫熒光技術(shù)對原代細胞進行鑒定,Dil與UEA雙染進行細胞鑒定,應(yīng)用CCK-8試劑對細胞進行增殖分析并繪制生長曲線,應(yīng)用血管成形試驗檢測EPCs成血管能力;2.貼壁法培養(yǎng)原代SMCs,倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)特征,免疫熒光技術(shù)進行細胞鑒定;3. Transwell法建立共培養(yǎng)模型,分別于共培養(yǎng)1

3、2h、24h、48h、72h行CCK8法測細胞增殖情況;應(yīng)用PCR技術(shù)檢測共培養(yǎng)24h組EPCs中VEGF、MMP2、MMP9和vWF基因表達;Western技術(shù)檢測VEGF蛋白表達情況。
　　結(jié)果:1.密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法培養(yǎng)的EPCs純度較高,具有較強的遷移及成血管能力;2.貼壁法培養(yǎng)的SMCs經(jīng)特異性抗體鑒定呈陽性;3.在共培養(yǎng)12h及24h時,SMCs促進皮祖細胞的增殖(p<0.05);4.共培養(yǎng)24h組的EPCs

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