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文檔簡介
1、目的:
檢測小鼠小腸缺血再灌注損傷模型及DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型中IL-21的表達(dá)情況,為小腸缺血再灌注損傷及炎癥性腸病等探索新的治療方案。
方法:
選用30只雄性C57BL6小鼠,隨機(jī)分成3組:假手術(shù)組(I)、I/Rlh組(J)和I/R5h組(K),每組10只。I組:只分離腸系膜上動脈,不做缺血再灌注處理;J組:阻斷腸系膜上動脈30min,I/Rlh后取標(biāo)本;K組:阻斷腸系膜上動脈30min,I
2、/R5h后取標(biāo)本。16只雄性ICR小鼠,隨機(jī)分成2組:生理對照組(A)和DSS實驗組(B)。A組小鼠正常進(jìn)食,自由飲水;B組小鼠正常進(jìn)食,飲用7%DSS溶液,連續(xù)7日。各實驗組于相應(yīng)的時間點取血,ELISA檢測血清中IL-21的濃度。I、J、K組取小腸組織,A、B組取結(jié)腸組織做H-E染色和免疫組化染色,觀察不同實驗組中的組織變化和IL-21含量。采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件,計量結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±SD)表示,組間比較采用非參數(shù)
3、檢驗法,P<0.05提示差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果:
1.各實驗組整體及組織病理形態(tài)學(xué)改變:I組:小腸呈粉紅色,有光澤;阻斷腸系膜上動脈后可見小腸顏色迅速轉(zhuǎn)為蒼白色,30分鐘后小腸呈暗紅色,失去光澤;J組:小腸呈暗紅色,水腫明顯,腸腔內(nèi)有液體;K組:小腸呈現(xiàn)暗紅色,腸腔內(nèi)見大量液體,部分腸管內(nèi)有淤血出現(xiàn)。A組:小鼠活潑,毛色光亮、潤澤,體重正常增加,大便一直為黑色顆粒狀,腸管色澤粉紅。B組小鼠口服7%DSS
4、后精神逐漸萎靡、嗜睡,毛色失去光澤,體重逐漸減輕,大便初始為黑色顆粒狀,第3日后逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)楹稚”?,于DSS處理后第7日出現(xiàn)鮮血樣便,伴有四肢末梢冷,精神較差。腸腔內(nèi)積血,色澤暗紅。
2.初始A、B組小鼠體重分別為25.1±2.5g、26.1±2.5g,二者差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);分別用蒸餾水和7%DSS處理后A、B組小鼠體重分別為30.9±2.5g、24.2±2.2g,二者差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
5、r> 3.血清中IL-21的含量:I組(1.8510±0.9936pg/ml)低于J組(3.2460±2.34201pg/ml),P<0.05;A組(1.3688±0.5463pg/ml)低于B組(3.8063±1.7593pg/ml),P<0.05);I組與K組(1.7520±0.7130pg/ml)、A組無明顯差別(P>0.05)。
4.I組、A組在腸粘膜上皮細(xì)胞層可見少量IL-21陽性細(xì)胞分布,J組、K組陽性細(xì)
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