AE2在胃癌中的表達(dá)及其功能研究.pdf

1、胃癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多因素的過(guò)程,多種因素共同作用使得胃粘膜逐步發(fā)展到癌前病變?cè)侔l(fā)展到胃癌.從正常胃粘膜到胃癌過(guò)程皆存在特征性的基因差異表達(dá),找出這些基因及其蛋白質(zhì)產(chǎn)物表達(dá)水平的變化與胃癌發(fā)生發(fā)展不同階段的相互關(guān)系及其規(guī)律,可能有助于早期發(fā)現(xiàn)胃癌.關(guān)于陰離子交換蛋白(anion exchangr,AE)家族在胃癌發(fā)生發(fā)展和凋亡過(guò)程中作用的研究目前少有報(bào)道.AE2主要表達(dá)于胃和小腸.在細(xì)胞內(nèi)酸堿穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中,AE家族起著重要的作用,在胃中高

2、表達(dá)的AE2主要調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)pH和胃酸的分泌.臨床調(diào)查研究中發(fā)現(xiàn)胃癌患者多存在胃酸缺乏,那么AE2在胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中是否起著關(guān)鍵性的作用,到目前為止尚不清楚.本課題旨在初步探討AE2在胃癌發(fā)生發(fā)展和三氧化二砷誘導(dǎo)人胃癌MKN45細(xì)胞凋亡過(guò)程中的作用和意義. 第一部分AE2在正常胃粘膜與胃癌組織中表達(dá)的比較 目的：通過(guò)比較AE2在正常胃粘膜與胃癌組織中的表達(dá),觀察AE2在胃癌發(fā)生過(guò)程中的作用. 方法：選擇經(jīng)病理組

3、織學(xué)確診的胃癌組(gastric cancer,GC)33例及對(duì)照組(control,C)16例,采用免疫組織化學(xué)、免疫組織熒光法檢測(cè)AE2在正常胃粘膜、胃癌組織中表達(dá). 結(jié)果：AE2在正常胃體胃底粘膜中高表達(dá),胃竇部粘膜中低表達(dá);而在胃體胃底腺癌組織中低表達(dá),胃竇部腺癌中廣泛表達(dá). 結(jié)論：AE2缺乏可能導(dǎo)致胃癌發(fā)生發(fā)展. 第二部分，目的：通過(guò)觀察三氧化二砷(arsenic trioxide,As203)及4,4

4、'一二異硫氰-2,2'二黃酸芪(4,4'-diiisothiocyanodihydros-tilbene-2,2'-disulphonicacid,DIDS)對(duì)胃癌MKN45細(xì)胞的抑制和誘導(dǎo)凋亡作用,研究AE2在As<,2>O<,3>誘導(dǎo)胃癌MKN45細(xì)胞凋亡過(guò)程中的作用. 方法：以不同濃度的As<,2>O<,3>及DIDS100umol/L作用于人胃癌MKN45細(xì)胞系,分五個(gè)時(shí)相倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)及數(shù)量改變:應(yīng)用

5、苔盼蘭染色法測(cè)定三氧化二砷對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制和誘導(dǎo)凋亡作用,同時(shí)設(shè)不加藥的對(duì)照組. 結(jié)果：在實(shí)驗(yàn)所用濃度范圍內(nèi),As<,2>O<,3>均能抑制MKN45胃癌細(xì)胞系的生長(zhǎng)并誘導(dǎo)其凋亡,隨著濃度的升高及作用時(shí)間的延長(zhǎng)作用增強(qiáng),這一作用能被AE2抑制劑DIDS阻斷. 結(jié)論：三氧化二砷能抑制胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng),促進(jìn)凋亡.其對(duì)胃癌細(xì)胞系的抑制作用可能是通過(guò)AE2起作用. 第三部分AE2與胃癌細(xì)胞pHi的關(guān)系 目的：通過(guò)檢