兒童血鉛水平與ADHD關(guān)系及藥物防治鉛中毒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、鉛是一種重要的環(huán)境毒物和神經(jīng)毒物。鉛可以損傷神經(jīng)系統(tǒng)的許多功能，尤其是兒童的智力發(fā)育，引起神經(jīng)行為、認(rèn)知功能和精神方面的障礙。兒童血鉛濃度高于100μg/L為兒童鉛中毒標(biāo)準(zhǔn)。流行病學(xué)調(diào)查顯示我國(guó)目前約有10％～30％的兒童血鉛超標(biāo)。鉛污染和兒童鉛中毒問(wèn)題在我國(guó)仍然相當(dāng)嚴(yán)重和普遍，嚴(yán)重阻礙兒童綜合素質(zhì)的健康發(fā)展。本文對(duì)兒童血鉛水平與兒童注意缺陷多動(dòng)障礙(ADHD)發(fā)病的關(guān)系，以及兒童鉛中毒的藥物防治的有關(guān)問(wèn)題進(jìn)行了研究。 1、兒童

2、血鉛水平與ADHD關(guān)系的病例對(duì)照研究?jī)和⒁馊毕荻鄤?dòng)障礙(Attention-deficithyperactivitydisorder,ADHD)是一種發(fā)生于兒童時(shí)期，以長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)的、明顯的注意力不集中和活動(dòng)過(guò)度為主要特征的疾病，學(xué)齡兒童中患病率為3％～7.5％。其病因不明，一般認(rèn)為，遺傳與環(huán)境因素都可能影響ADHD的發(fā)生、發(fā)展。為了闡明兒童血鉛水平與ADHD發(fā)病的關(guān)系，我們對(duì)安徽省立兒童醫(yī)院和安徽省中醫(yī)文獻(xiàn)研究所兒童多動(dòng)癥專(zhuān)病門(mén)診6-

3、12歲1050例兒童多動(dòng)癥病例和800例非多動(dòng)癥兒童對(duì)照病例，進(jìn)行大樣本的病例對(duì)照研究。 我們的研究采用了多因素的Logistic回歸分析，納入的影響因素包括受試對(duì)象的血鉛水平，以及被認(rèn)為與ADHD發(fā)病相關(guān)的一些混雜因素，如患兒性別、母親懷孕和分娩期狀況、父母文化程度以及受試對(duì)象出生時(shí)父母親的年齡等。我們采用基于最大似然估計(jì)的向后逐步回歸法(thebackwardstepwiselogisticregressionmodelsb

4、asedonthemaximumpartiallikelihoodestimates)，剔除混雜因素，擬合Logistic回歸模型，結(jié)果表明，兒童血鉛水平、性別及父母文化程度與ADHD有關(guān)。把血鉛水平按100μg/L和50μg/L的分界標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)換為分類(lèi)變量，以此進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果表明，血鉛水平較高的兒童患ADHD危險(xiǎn)性增高(＞50μg/L，OR=2.11，P＜0.001；＞100μg/L，OR=4.09，P＜0.001)。

5、對(duì)受試對(duì)象的血鉛平均水平及其在不同血鉛水平分布頻數(shù)的分析也表明，ADHD患兒具有較高的血鉛水平。 研究提示6-12歲兒童中，ADHD和鉛暴露存在顯著的關(guān)聯(lián)，即使是低水平的鉛暴露。在兒童ADHD的防治中，血鉛水平是應(yīng)加以考慮的重要因素之一。 2、尼古丁對(duì)慢性鉛暴露NMDA受體介導(dǎo)的突觸可塑性損傷的修復(fù)作用及可能機(jī)制突觸可塑性被認(rèn)為是學(xué)習(xí)記憶的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)，長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)效應(yīng)(LTP)是突觸可塑性的一種重要形式。膽堿能系統(tǒng)通過(guò)

6、作用于谷氨酸能突觸傳遞，影響突觸可塑性，從而影響學(xué)習(xí)記憶。尼古丁(nicotine，NIC)是nAChR的激動(dòng)劑。nAChR的活化可調(diào)節(jié)LTP。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用離體腦片場(chǎng)電位記錄技術(shù)，在大鼠海馬腦片CA1區(qū)上通過(guò)記錄雪氏側(cè)枝-CA1錐體神經(jīng)元樹(shù)突層通路fEPSP和PPF，探討尼古丁對(duì)鉛暴露大鼠突觸可塑性的影響及其可能的作用機(jī)制。 1)新生Wistar大鼠自出生第一天開(kāi)始到斷奶為止，母鼠每天喂0.2％(1090ppm)的醋酸鉛溶液20m

7、l，幼鼠經(jīng)母乳攝入鉛。在23-30天的海馬腦片上灌流1μMNIC，通過(guò)100Hz，20Pulses的刺激誘導(dǎo)LTP。結(jié)果表明1μMNIC明顯易化了鉛鼠海馬CA1區(qū)LTP的誘導(dǎo)和表達(dá)；而且該易化作用被煙堿樣膽堿受體拮抗劑Mecamylamine(MEC)阻斷，提示該易化效應(yīng)通過(guò)nAChR起作用。 2)進(jìn)一步應(yīng)用α7-nAChR拮抗劑methyllycaconitine(MLA)和NIC灌流可誘導(dǎo)LTD。而non-α7-nAChR拮

8、抗劑Dihydro-β-erythroidine(DHβE)灌流則可阻斷該LTD以及NIC對(duì)鉛鼠LTP的易化。表明α7和non-α7nAChR兩種受體都參與了該修復(fù)作用。 3)NIC對(duì)鉛鼠的LTP易化作用可被NMDA受體拮抗劑D-(-)-2-amino-5-phosphonopentanoicacid(D-AP5)或GABAA受體拮抗劑picrotoxin(PTX)阻斷。并且NIC增強(qiáng)了鉛鼠海馬CA1區(qū)PPF效應(yīng)。說(shuō)明尼古丁對(duì)鉛

9、鼠LTP的易化作用是NMDA受體依賴性的，是通過(guò)突觸前的nAChR上GABAA受體對(duì)錐體神經(jīng)元的去抑制而發(fā)揮作用。 這些結(jié)果表明，尼古丁急性灌流通過(guò)nAChR易化染鉛大鼠海馬腦片LTP，多種nAChR受體亞型參與此作用。該作用可能通過(guò)突觸前的nAChR上GABAA受體對(duì)錐體神經(jīng)元的去抑制從而增強(qiáng)NMDA受體功能。 3、硫辛酸對(duì)慢性鉛暴露大鼠引起氧化損傷和LTP損傷的影響鉛作用的毒理機(jī)制是復(fù)雜的，除了引起神經(jīng)元突觸可塑性損

10、傷外，鉛暴露導(dǎo)致的生物體內(nèi)氧化應(yīng)激(oxidativestress)被認(rèn)為是其發(fā)揮毒性作用的另一重要途徑。硫辛酸(alpha-lipoicacid，LA)是一種強(qiáng)抗氧化劑，能夠再生內(nèi)源性抗氧化劑，如VE、VC、輔酶Q10、谷胱甘肽(glutathione，GSH)等。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用離體腦片場(chǎng)電位記錄LTP，結(jié)合抗氧化指標(biāo)的測(cè)定(如MDA含量、GSH和總SOD活力)，研究了LA對(duì)慢性鉛暴露致氧化損傷和LTP損傷的修復(fù)作用。 本實(shí)驗(yàn)Wi

11、star大鼠鉛暴露方式同尼古丁實(shí)驗(yàn)。在大鼠出生后14天，分別在對(duì)照組和鉛暴露組大鼠腹腔注射四種不同劑量LA(10，25，50，100mg/kg，i.p.)，一天一次，連用七天。用藥結(jié)束后休息一天，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：1)四種不同劑量LA均不能顯著降低鉛鼠海馬組織中鉛的含量；2)對(duì)鉛暴露組，各劑量LA均有修復(fù)鉛引起的海馬CA1區(qū)LTP損傷的作用，并能降低血漿、海馬和全腦中MDA含量，提高血漿、海馬和全腦GSH和總SOD活力，表明LA能夠修