兒童中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤的臨床病理特點(diǎn)及EGFR、HER-2、β-catenin表達(dá)的研究.pdf

1、目的:中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system，CNS）腫瘤發(fā)病率位于兒童實(shí)體腫瘤的首位，近年的資料表明兒童CNS腫瘤發(fā)病率有逐年上升趨勢(shì)。本文對(duì)兒童（≤16歲）中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤，包括髓母細(xì)胞瘤（medulloblastoma，MB），小細(xì)胞膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma，GB）和原始神經(jīng)外胚層腫瘤（Primitive Neuroectodermal Tumor，PNET）進(jìn)行研究。目的在于探討兒童中樞神經(jīng)小

2、細(xì)胞腫瘤病理特征，分析與小細(xì)胞腫瘤預(yù)后相關(guān)的臨床及病理學(xué)因素，并對(duì)中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤中EGFR，HER—2，β—catenin蛋白表達(dá)和HER—2基因擴(kuò)增進(jìn)行研究，探討其在中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤發(fā)生機(jī)制上的作用及其與患者預(yù)后的關(guān)系。 方法:按照2007年 WHO CNS腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)山東大學(xué)齊魯醫(yī)院1995～2007年間16歲及其以下兒童顱內(nèi)和椎管內(nèi)腫瘤進(jìn)行回顧性分析。統(tǒng)計(jì)1996～2008年間中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤的流行病學(xué)及臨床治

3、療情況，進(jìn)行隨訪。對(duì)中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤進(jìn)行EGFR，HER—2，ki67，β—catenin免疫標(biāo)記，分析其表達(dá)情況與臨床病理指標(biāo)間的關(guān)系。采用熒光原位雜交法（Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）檢測(cè)HER—2基因擴(kuò)增情況。利用SPSS13．0軟件做單因素生存分析和多因素COX回歸分析，并繪制Kaplan—Meier生存曲線。 結(jié)果: 1．1995年1月到2007年12月期間，

4、齊魯醫(yī)院病理科診斷的兒童CNS腫瘤共330例，占同期全部4，788例CNS腫瘤的6．89％。其中男性196例，女性134例。腫瘤部位為幕上192例，幕下107例。椎管內(nèi)31例。病理組織學(xué)類型前3位依次是：星形細(xì)胞瘤94例（28．48％），胚胎性腫瘤58例（17．58％）和顱咽管瘤49例（14．85％）。兒童CNS腫瘤除胚胎性腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤以外，其余各類型腫瘤均以WHO低級(jí)別腫瘤為主。隨著年齡增長(zhǎng)，CNS腫瘤有逐步上升的趨勢(shì)。

5、 2．選取中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤71例，其中MB（44例），小細(xì)胞GB（19例），PNET（8例）。患者平均年齡依次為10歲、11．4歲和10．5歲。男女比例分別為1．59：1，2．17：1和1：1。手術(shù)全切率為50％、36．84％和50％。術(shù)后接受系統(tǒng)放療的患者占各組病例數(shù)分別為38．64％，36．84％和50％。對(duì)全部71例患者進(jìn)行隨訪，截至2008年12月31日隨訪結(jié)束，65例獲訪，其中MB40例，小細(xì)胞GB17例，PNET8例，獲訪

6、率91．55％。45名患者死亡，20例存活。隨訪時(shí)間4個(gè)月到156個(gè)月，平均時(shí)間84個(gè)月?；颊叽婊顣r(shí)間4個(gè)月到118個(gè)月，平均存活時(shí)間44．8個(gè)月?；颊咧形簧嫫诜謩e為23±6．7個(gè)月，8±4．7個(gè)月和10±1．4個(gè)月。 3．44例MB中20例可見鏡下壞死，其中12例壞死面積較大。19例小細(xì)胞GB鏡下均可見壞死，其中14例壞死程度較輕。8例PNET有4例鏡下觀察到明顯壞死。單因素生存分析顯示腫瘤壞死，尤其是壞死范圍較大的患者預(yù)后

7、不良（P<0．05）。腫瘤有血管增生，膠質(zhì)分化和菊形團(tuán)結(jié)構(gòu)對(duì)三組預(yù)后均無明顯影響（P>0．05）。 4．在MB、小細(xì)胞GB和PNET中，ki67在各自兩組之間的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0．05）。單因素生存分析顯示ki67陽性標(biāo)記指數(shù)對(duì)三組預(yù)后均無明顯影響（P>0．05）。MB、小細(xì)胞GB和PNET核分裂象個(gè)數(shù)從5/10 HPF到50/10HPF不等，其平均分裂象個(gè)數(shù)分別為6．81/10HPF、6．33/10HPF和10/10HP

8、F。核分裂象計(jì)數(shù)與三組腫瘤的預(yù)后均無明顯關(guān)系（P>0．05）。MB和小細(xì)胞GB的ki67表達(dá)與核分裂象個(gè)數(shù)之間有明顯正相關(guān)性（P分別為0．001和0．00001）。 5．免疫組織化學(xué)染色顯示在MB，小細(xì)胞GB和PNET中，各自兩組之間EGFR的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0．05）。單因素生存分析顯示EGFR高表達(dá)與三組預(yù)后不良均有明顯關(guān)系（P<0．05）。HER—2在各組病例中均無陽性表達(dá)。 6．免疫組織化學(xué)染色顯示在MB，

9、小細(xì)胞GB和PNET中，β—catenin胞漿陽性表達(dá)在各組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0．05）。單因素生存分析顯示β—catenin胞漿表達(dá)高于50％的各組患者預(yù)后均較差。β—catenin在MB，小細(xì)胞GB和PNET中胞核出現(xiàn)陽性表達(dá)病例分別占各組總例數(shù)的38．24％，6．67％和28．57％。單因素生存分析顯示β—catenin核表達(dá)的MB患者預(yù)后較好（P<0．05），且漿、核表達(dá)存在明顯的負(fù)相關(guān)性（spearman相關(guān)系數(shù)為—0

10、．6417，P=0．0000431）。β—catenin核表達(dá)雖然與PNET的預(yù)后無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但2例出現(xiàn)β—catenin核表達(dá)的患者，生存期均已超過4年半，至今仍存活。β—catenin核表達(dá)在GB中僅見1例，與預(yù)后無明顯相關(guān)。 7．在10例MB（占本組29．41％）中應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)（FISH）檢測(cè)HER—2基因，均未發(fā)現(xiàn)基因擴(kuò)增。 8．應(yīng)用COX回歸分析對(duì)MB，小細(xì)胞GB和PNET進(jìn)行多因素回歸分析。結(jié)果

11、顯示在三組腫瘤中術(shù)后放療者的生存期明顯長(zhǎng)于未放療患者，術(shù)后接受放療者的存活期均超過中位生存期。在MB中預(yù)后良好的因素為β—catenin核表達(dá)，預(yù)后不良的因素為EGFR高表達(dá)、β—catenin胞漿表達(dá)和腫瘤壞死。小細(xì)胞GB中與預(yù)后不良相關(guān)的因素分別為EGFR高表達(dá)和腫瘤大片壞死，PNET中預(yù)后不良的因素分別為EGFR表達(dá)，β—catenin胞漿表達(dá)和腫瘤壞死。 結(jié)論: 1．兒童CNS腫瘤最常見的組織學(xué)類型是星形細(xì)胞瘤、

12、胚胎性腫瘤和顱咽管瘤。男性好發(fā)。隨著年齡增長(zhǎng)，兒童CNS腫瘤有逐步上升的趨勢(shì)。 2．MB和小細(xì)胞GB以男性多見，PNET患者未見明顯性別優(yōu)勢(shì)。三組腫瘤均為高度惡性，預(yù)后不良。 3．術(shù)后接受放療是影響患者生存時(shí)間的重要因素，各組術(shù)后接受放療患者生存期明顯長(zhǎng)于未接受放療者。 4．各組腫瘤中出現(xiàn)明顯壞死者預(yù)后不良，腫瘤血管增生，膠質(zhì)分化及菊形團(tuán)的形成與患者預(yù)后無關(guān)。 5．ki67表達(dá)率和細(xì)胞核分裂象計(jì)數(shù)與中樞神

13、經(jīng)小細(xì)胞腫瘤的預(yù)后無關(guān)。 6．EGFR在三組腫瘤中的表達(dá)率均較高，考慮其異常表達(dá)與中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤的發(fā)生有一定的關(guān)系。EGFR高表達(dá)的中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤患者預(yù)后差，因此可將其作為中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤預(yù)后的指標(biāo)。 7．HER—2在三組病例中均未見陽性表達(dá)，基因也無擴(kuò)增，其在中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤發(fā)生過程中作用尚待進(jìn)一步研究。 8．β—catenin在三組腫瘤中均有較高陽性表達(dá)，其胞漿高表達(dá)的中樞神經(jīng)小細(xì)胞腫瘤預(yù)后差，但