弗勞地枸櫞酸桿菌產(chǎn)KPC-2型碳青霉烯酶的研究.pdf

1、目的：
　　研究弗勞地枸櫞酸桿菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥機(jī)制。
　　材料與方法：
　　菌株來源
　　收集安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2010年1月～2011年10月間住院和門診送檢標(biāo)本61株(剔除重復(fù)株)。標(biāo)本種類分布:痰液39份、分泌物14份、尿液8份。全部菌株均使用WalKAway-96細(xì)菌鑒定儀鑒定為弗勞地枸櫞酸桿菌。質(zhì)控菌包括大腸埃希菌ATCC25922、K.pneumoniae ATCC BAA-1705、

2、K.pneumoniae ATCC BAA-1706(均為安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科保存)。利福平耐藥的大腸埃希菌EC600用于接合試驗的受體菌。
　　方法
　　參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)[28]用瓊脂稀釋法檢測61株弗勞地枸櫞酸桿菌對亞胺培南和美羅培南以及其他常見藥物的最低抑菌濃度(MIC)。改良Hodge試驗對61株弗勞地枸櫞酸桿菌進(jìn)行耐藥表型檢測,等電聚集電泳分析其β-內(nèi)酰胺酶類型,聚合酶鏈反應(yīng)(P

3、CR)和DNA序列分析檢測β-內(nèi)酰胺酶基因型,接合試驗分析其耐藥質(zhì)粒傳遞情況。
　　結(jié)果：
　　只有一株碳青霉烯類抗生素耐藥的弗勞地枸櫞酸桿菌改良 Hodge試驗結(jié)果為陽性,該株弗勞地枸櫞酸桿菌對亞胺培南和美羅培南的 MIC均為64μg/ml、對青霉素類、頭孢菌素類、頭孢西丁、氨曲南和氨基糖甙類均耐藥。轉(zhuǎn)移接合試驗結(jié)果顯示弗勞地枸櫞酸桿菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥性可以通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)移。等點(diǎn)聚焦電泳結(jié)果顯示弗勞地枸櫞酸桿菌具有約