弗勞地枸櫞酸桿菌產(chǎn)KPC-2型碳青霉烯酶的研究.pdf

1、目的：
　　研究弗勞地枸櫞酸桿菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗生素的耐藥機(jī)制。
　　材料與方法：
　　菌株來(lái)源
　　收集安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2010年1月～2011年10月間住院和門(mén)診送檢標(biāo)本61株(剔除重復(fù)株)。標(biāo)本種類(lèi)分布:痰液39份、分泌物14份、尿液8份。全部菌株均使用WalKAway-96細(xì)菌鑒定儀鑒定為弗勞地枸櫞酸桿菌。質(zhì)控菌包括大腸埃希菌ATCC25922、K.pneumoniae ATCC BAA-1705、

2、K.pneumoniae ATCC BAA-1706(均為安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科保存)。利福平耐藥的大腸埃希菌EC600用于接合試驗(yàn)的受體菌。
　　方法
　　參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)[28]用瓊脂稀釋法檢測(cè)61株弗勞地枸櫞酸桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南以及其他常見(jiàn)藥物的最低抑菌濃度(MIC)。改良Hodge試驗(yàn)對(duì)61株弗勞地枸櫞酸桿菌進(jìn)行耐藥表型檢測(cè),等電聚集電泳分析其β-內(nèi)酰胺酶類(lèi)型,聚合酶鏈反應(yīng)(P

3、CR)和DNA序列分析檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶基因型,接合試驗(yàn)分析其耐藥質(zhì)粒傳遞情況。
　　結(jié)果：
　　只有一株碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥的弗勞地枸櫞酸桿菌改良 Hodge試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性,該株弗勞地枸櫞酸桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的 MIC均為64μg/ml、對(duì)青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、頭孢西丁、氨曲南和氨基糖甙類(lèi)均耐藥。轉(zhuǎn)移接合試驗(yàn)結(jié)果顯示弗勞地枸櫞酸桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥性可以通過(guò)質(zhì)粒轉(zhuǎn)移。等點(diǎn)聚焦電泳結(jié)果顯示弗勞地枸櫞酸桿菌具有約