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1、目的：該研究擬通過建立永生化的正常大腸干(Crypt)細(xì)胞為靶點(diǎn),探討微囊藻毒素和H.pylori菌CagA蛋白致正常大腸干(Crypt)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用,并觀察分析轉(zhuǎn)化過程中的分子事件的改變.提供候選的大腸癌變前期及早期分子標(biāo)記,為從深層次發(fā)病機(jī)制上干預(yù)阻斷、預(yù)防大腸癌發(fā)生提供理論依據(jù).結(jié)論：1.異位表達(dá)SV40大T抗原和hTERT實現(xiàn)對正常大腸干細(xì)胞的永生化,并建立了正常的大腸干(Crypt)細(xì)胞系.永生化的大腸干(Crypt)細(xì)胞經(jīng)
2、接種裸鼠和軟瓊脂克隆試驗均表明該細(xì)胞系無致瘤性,已傳代80余代無衰老跡象.2.微囊藻毒素作用致人大腸干(Crypt)細(xì)胞基因組DNA加成物8-OhdG的形成,顯示微囊藻毒素具有致癌劑的作用.3.國人來源的H.pylori菌株與西方國家的菌株相比CagA蛋白的C端結(jié)構(gòu)不同.國人不同的H.pylori菌株的CagA蛋白大小不同,但在干擾細(xì)胞信息通路中的磷酸化能力等同.4.微囊藻毒素、幽門螺桿菌CagA蛋白和二甲肼可以致正常大腸干(Crypt
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