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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
本實(shí)驗(yàn)室早期試驗(yàn)已經(jīng)證明通過(guò)孕期應(yīng)激(Prenatal Maternal Stress, PMS)可以導(dǎo)致子代成年雄性大鼠結(jié)腸痛覺(jué)過(guò)敏及胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase, CBS)蛋白的高表達(dá),所以本實(shí)驗(yàn)將重點(diǎn)研究CBS是否參與調(diào)控電壓門(mén)控型鈉通道在孕期應(yīng)激誘導(dǎo)的慢性內(nèi)臟痛中的作用。
方法:
1.把懷孕的雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠分成實(shí)驗(yàn)(PMS
2、)組和對(duì)照(CON)組。PMS大鼠從懷孕第6天開(kāi)始每天給予異源型慢性應(yīng)激(Heterotypical Intermittent Stress, HIS),直到第22天。
2.子代出生后,挑選雄性個(gè)體,分別在3周、6周、8周、10周及12周五個(gè)時(shí)間點(diǎn)提取腸相關(guān)脊髓背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal Root Ganglion, DRG),運(yùn)用western blotting及RT-PCR方法檢測(cè)CBS及鈉通道亞型Nav1.7、Nav1.8
3、和Nav1.9的表達(dá)。
3.腹腔注射 CBS拮抗劑 AOAA,運(yùn)用western blotting檢測(cè) DRG T13-L2中Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9的蛋白表達(dá)變化。
結(jié)果:
1.孕期應(yīng)激可增高子代大鼠腸相關(guān)DRG中CBS蛋白表達(dá)水平。
2.孕期應(yīng)激同樣增高子代大鼠腸相關(guān)DRG中Nav1.7,Nav1.8及Nav1.9蛋白及mRNA表達(dá)水平。
3.對(duì)照大鼠的Nav1.7及
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