膠原蛋白基因與散發(fā)性顱內(nèi)動脈瘤的相關(guān)性研究.pdf

1、背景： 蛛網(wǎng)膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage，SAH)發(fā)病率、死亡率高，仍是當(dāng)今世界主要的公共健康問題。80％的自發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血是由于顱內(nèi)動脈瘤的破裂，破裂動脈瘤的愈后很差，50％的病人1月內(nèi)死亡，25％的病人遺留終生殘疾，25％的病人還活在再出血的風(fēng)險中。相反，如未破裂動脈瘤得到及時治療，只有不到2.5％的死亡率和6％的致殘率。顱內(nèi)動脈瘤占普通人群的2％，大約3％-6％的大于30歲的人群帶有無癥狀

2、的未破裂動脈瘤。蛛網(wǎng)膜下腔出血的年發(fā)病率是10-15/10萬人，破裂動脈瘤常見年齡是40歲-60歲，蛛網(wǎng)膜下腔出血男女比例是1:1.6，30％的病人伴有多發(fā)性動脈瘤。 盡管顱內(nèi)動脈瘤的發(fā)病率高，一旦破裂后果嚴重，顱內(nèi)動脈瘤的發(fā)病機理知道的很少，目前認為顱內(nèi)動脈瘤是遺傳和環(huán)境因素共同起作用的復(fù)雜疾病，高血壓病、吸煙、喝酒是動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血的通常的危險因素。最近在分子遺傳學(xué)方面的進展，尤其是人類基因組計劃實施以來，使研究顱內(nèi)動

3、脈瘤的遺傳因素成為可能，數(shù)個研究支持I型膠原蛋白α2鏈(Collagen Type I α2 gene，COL1A2)基因和彈力蛋白(Elastin，ELN)基因是與顱內(nèi)動脈瘤相關(guān)的可能性最大的候選基因。 COL1A2基因位于7q22.1，COL1A2基因的突變引起成骨不全，主要癥狀是骨骼變脆和結(jié)締組織異常，屬于常染色體顯性遺傳病。2001年，Peters等的基因表達系列分析(serial analysis of gene ex

4、pression，SAGE)發(fā)現(xiàn)細胞外基質(zhì)蛋白如纖維結(jié)合蛋白、膠原蛋白家族(COL1A1, COL1A2,COL3A1,COL6A1,COL6A2)、ELN基因在顱內(nèi)動脈瘤中過度表達，我們對3例動脈瘤頂?shù)幕蛐酒治鲆舶l(fā)現(xiàn)COL1A2基因在動脈瘤頂標本中過表達；Onda等的連鎖分析，將動脈瘤的易感基因定位于5q22-31、7q11、14q22，最好的證據(jù)是7q11，在基因座D7S2472附近，D7S2472區(qū)域的候選基因是ELN基因、K

5、IRT1基因、COL1A2基因；2004年，Yoneyama等的關(guān)聯(lián)分析，發(fā)現(xiàn)COL1A2因第28外顯子rs42524位點多態(tài)性與顱內(nèi)動脈瘤相關(guān)，該單核苷酸多態(tài)性(Single nucleus polymorphisms，SNP)引起三螺旋結(jié)構(gòu)域第549個氨基酸位點上的丙氨酸被脯氨酸替代，脯-549氨基酸殘基在Gly-X-Y重復(fù)結(jié)構(gòu)的Y位置，運用循環(huán)二色光譜法顯示脯氨酸多肽較丙氨酸多肽對熱更穩(wěn)定，推測氨基酸的替代影響了血管壁的脆性和彈性

6、，導(dǎo)致動脈瘤的形成；而2006年Kuhlenbaume等的關(guān)聯(lián)分析未發(fā)現(xiàn)與顱內(nèi)動脈瘤相關(guān)的COL1A2基因rs42524位點的多態(tài)性與自發(fā)性頸動脈夾層動脈瘤相關(guān)。由于已有基因連鎖分析的結(jié)果支持COL1A2基因是與顱內(nèi)動脈瘤相關(guān)的可能性最大的候選基因，而兩個關(guān)聯(lián)分析的結(jié)果相矛盾，又由于不同種族的人群之間存在基因異質(zhì)性，COL1A2基因多態(tài)性與顱內(nèi)動脈瘤之間的相關(guān)關(guān)系在中國人群還沒有研究，這些問題構(gòu)成了本研究的設(shè)計思路和研究目的。

7、研究目的： 1.在中國北方漢族人群中探討COL1A2基因rs42524多態(tài)性與散發(fā)顱內(nèi)囊性動脈瘤的相關(guān)關(guān)系。 2.進一步證明COL1A2基因是顱內(nèi)動脈瘤的致病基因。 研究方法： 山東大學(xué)倫理委員會批準這個研究協(xié)議，所有參與者都簽訂書面贊同協(xié)議。收集山東省立醫(yī)院2004年6月至2007年12月收治的確診的226例顱內(nèi)囊性動脈瘤病例，平均51.49±11.47歲，選擇326例同期顱腦損傷等住院患者為對照組，年

8、齡52.33±10.50歲，臨床神經(jīng)狀態(tài)評價用Hunt-Hess分級。利用聚合酶鏈式反應(yīng)-限制性酶切方法，對COL1A2基因rs42524位點多態(tài)性進行基因分型。病例和對照之間的基因型和等位基因差異用卡方檢驗。應(yīng)用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析，P值＞0.05有顯著性差異。用logistic回歸糾正性別、年齡、高血壓、吸煙和飲酒等因素。 結(jié)果：及意義： 在動脈瘤組和對照組之間rs42524位點的基因型分布有顯著差異(卡方=

9、11.99，P=0.002)，C等位基因頻率也有顯著差異(卡方：11.96；OR=2.58；95％CI，1.49-4.48；P=0.001)。女性是顱內(nèi)動脈瘤的危險因素(卡方=8.44；OR=2.69，95％CI，1.35-5.33；P=0.004)。用logistic回歸糾正性別、年齡、高血壓、吸煙和飲酒等因素結(jié)果沒有改變。 結(jié)論：及意義： 1.在中國北方漢族人群中COL1A2基因rs42524位點多態(tài)性與散發(fā)顱內(nèi)囊性