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1、第一部分原位RT-PCR檢測人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞株雌激素受體亞型的表達(dá).目的:觀察人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞株雌激素受體亞型的表達(dá)特征,并為進(jìn)一步應(yīng)用原位RT-PCR作方法學(xué)準(zhǔn)備.結(jié)論:(1)原位RT-PCR前必須用無RNA酶的DNA酶消化檢測點及陰性對照點的內(nèi)源性DNA.(2)用MG-63細(xì)胞株作為成骨細(xì)胞模型,制備原位RT-PCR細(xì)胞涂片的最佳時期是接種培養(yǎng)后第9天.(3)MG-63細(xì)胞株存在ERα和ERβ基因的mRNA表達(dá).(4
2、)MG-63細(xì)胞株ERα表達(dá)比ERβ豐富,這表明兩者在功能上存在差異.第二部分尼爾雌醇和左炔諾孕酮對人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞株雌激素受體亞型及OPG/OPGL0的作用.目的:觀察不同濃度的尼爾雌醇(NYL)和左炔諾孕酮(LNG)對MG-63細(xì)胞株ERα和ERβ、OPG及OPGL表達(dá)的作用,探討旁分泌效應(yīng)對以上基因表達(dá)的影響.結(jié)論:(1)NYL和LNG可誘導(dǎo)MG-63細(xì)胞株ER亞型mRNA表達(dá)上調(diào),且兩種亞型的表達(dá)存在相互制的關(guān)系.(2)
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