雷米普利與BQ-123對(duì)大鼠在體心肌缺血-再灌注損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：研究雷米普利與BQ-123單用及其聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠在體心肌缺血/再灌注（I/R）損傷的保護(hù)作用。 方法：健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為5組。①假手術(shù)（sham）組；②心肌缺血再灌注（I/R）組；③雷米普利（RAM）組；④BQ-123（BQ）組；⑤雷米普利與BQ-123聯(lián)合給藥（R＆B）組。除sham組，其余各組均于心臟穿線后實(shí)施冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）30 min缺血/120 min再灌注（I/R）。術(shù)前24 hr，RA

2、M及R&B組以雷米普利1 mg/kg灌胃，其余3組以等體積生理鹽水灌胃。手術(shù)過程中，于LAD結(jié)扎前10min至結(jié)扎30min末，BQ及R&B組持續(xù)靜脈輸入BQ-123（10μg/kg/min）2 ml，其余3組以等體積生理鹽水持續(xù)靜脈輸入。sham組心臟穿線后不實(shí)施I/R過程。連續(xù)監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖（ECG），記錄缺血期間室性心律失常（VA）的發(fā)生情況；比色法檢測(cè)血漿肌酸激酶（CK）與乳酸脫氫酶（LDH）活力；TTC染色測(cè)定心肌梗死面

3、積；HE染色觀察心肌形態(tài)學(xué)改變；原位末端標(biāo)記法（TUNEL）和瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡；免疫組化法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bcl-2與Bax的蛋白表達(dá)；比色法檢測(cè)心肌組織caspase3活力。 結(jié)果： 1．雷米普利及BQ-123單用對(duì)大鼠在體心肌I/R損傷的影響 I/R組，缺血期ST-段抬高幅度顯著提高（p<0．001），室早（VPC）出現(xiàn)時(shí)間為5．10±0．71 min，持續(xù)時(shí)間為19．94±3．56 mi

4、n；室速（VT）出現(xiàn)時(shí)間為6．05±1．65 min，持續(xù)時(shí)間為13．72±5．06 min； VPC、VT及室顫（VF）發(fā)生率均為100％；血漿CK及LDH活性均顯著升高；梗死面積（IS）為83．74±8．73 mg，梗死區(qū)/危險(xiǎn)區(qū)（IS/AAR）為36．68±4．30％；心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）為37．72±0．87％；Bcl-2/Bax比值為0．35±0．06；心肌組織caspase3活力為5265．70±387．56 U/μg。

5、 與I/R組比較，RAM及BQ組均顯著降低缺血期ST-段抬高幅度（p<0．001），顯著推遲VPC（10．27±2．63；7．77±0．87 min）及VT（10．57±1．32；8．74±0．96 min）出現(xiàn)時(shí)間，縮短VPC（9．55±1．10；7．59±1．99 min）及VT（5．63±1．45；5．38±0．80 min）持續(xù)時(shí)間，降低VPC、VT及VF發(fā)生率；顯著降低血漿CK及LDH活性（p<0．001）；顯著縮小I

6、S（46．72±9．23；41．71±7．85 mg），降低IS/AAR（22．65±2．30；20．43±3．79％）；顯著減少心肌細(xì)胞AI（23．94±1．81；21．41±1．67％）；顯著增加Bcl-2/Bax比值（0．75±0．13；0．84±0．14）；顯著降低心肌組織caspase3活力（4070．04±417．86；3894．71±374．96 U/μg）。心肌形態(tài)學(xué)損傷均明顯減輕，DNA瓊脂糖凝膠電泳相應(yīng)條帶的彌散程度

7、減弱。 2．雷米普利與BQ-123聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠在體心肌I/R損傷的影響 與I/R組比較，R&B組ST-段抬高幅度顯著降低（p<0．001），顯著推遲VPC（9．17±1．58 min）及VT（8．91±1．45 min）出現(xiàn)時(shí)間，縮短VPC（6．88±1．49 min）及VT（4．69±0．90 min）持續(xù)時(shí)間；降低VT（59％）及VF（12％）發(fā)生率。顯著降低血漿CK及LDH活性；顯著縮小IS（31．09±6．08

8、 mg），降低IS/AAR（15．83±4．67％）；顯著減少心肌細(xì)胞AI（15．68±1．45％）；顯著增加Bcl-2/Bax（0．92±0．13）比值；顯著降低心肌組織caspase3活力（3501．62±266．79 U/μg）。心肌形態(tài)學(xué)改變明顯減輕，DNA瓊脂糖凝膠電泳顯示條帶彌散程度明顯減弱。 分別與RAM及BQ組單用比較，R&B組再灌注30min及120min時(shí)MAP明顯升高；缺血30 min末CK活力及再灌注12

9、0min末LDH活力均顯著降低（p<0．001）；IS及IS/AAR比值均顯著下降（p<0．01，p<0．05）；凋亡的心肌細(xì)胞顯著減少（p<0．001），DNA片段的彌散程度明顯減輕，心肌組織caspase3活力顯著降低（p<0．01，p<0．05）。并且與BQ組比較，VPC出現(xiàn)時(shí)間明顯推遲（p<0．05）；與RAM組比較，VPC持續(xù)時(shí)間明顯縮短（p<0．01），Bcl-2蛋白表達(dá)陽性心肌細(xì)胞百分比升高（p<0．05），Bcl-2/B

10、ax比值升高（p<0．05）。 結(jié)論： 1．雷米普利與BQ-123單用均對(duì)大鼠在體心肌FR損傷具有保護(hù)作用，均可減輕缺血期室性心律失常的發(fā)生程度，降低ST-段抬高幅度，減少心肌組織CK及LDH漏出，減少I/R心肌細(xì)胞壞死和凋亡，上調(diào)抑凋亡基因Bcl-2、下調(diào)促凋亡基因Bax表達(dá)以及降低凋亡蛋白酶caspase3活力。 2．本實(shí)驗(yàn)首次探討雷米普利與BQ-123合用對(duì)大鼠在體心肌I/R損傷的保護(hù)作用。結(jié)果表明聯(lián)合用藥