大緯度引種青蒿藥效、產(chǎn)量影響因子及藥效分析方法學(xué)研究.pdf

1、本文改進(jìn)并建立了青蒿素提取、分析方法;以此為基礎(chǔ)評(píng)價(jià)了黑龍江省青蒿野生資源的利用價(jià)值;并分別于2006、2007和2008年從北緯23～300間的云南、廣西、四川、湖南等地，引進(jìn)了若干優(yōu)質(zhì)種源，在北緯4e60以上的黑龍江省不同地區(qū)栽培，篩選出適合本地生長(zhǎng)、含量高的青蒿種源，建立了青蒿引種栽培技術(shù);研究了影響青蒿素含量、藥用生物量的主要因子，選擇對(duì)青蒿素產(chǎn)量影響大的因子進(jìn)行正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，確定了高產(chǎn)青蒿的施肥技術(shù)。為黑龍江引種青蒿，開(kāi)展大規(guī)

2、模栽培生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　1、改進(jìn)建立了恒溫振蕩浸提法作為青蒿素的提取方法:精確稱取青蒿粗粉1.000g，40℃干燥3h，以20 mL石油醚(60～90℃)為溶劑，30℃恒溫振蕩提取24 h，頻率120 r/min，連續(xù)提取4次，每次將前一次的提取液傾出加入10 mL提取溶劑，共提取4d，合并提取液，總量為50 mL。該方法應(yīng)用設(shè)備簡(jiǎn)單、可操作性強(qiáng);提取溶劑經(jīng)濟(jì)、毒性小、回收方便、可重復(fù)利用;提取物雜質(zhì)量小

3、、適合工業(yè)生產(chǎn)操作。
　　2、改進(jìn)建立了新的青蒿素柱前衍生HPLC-UV測(cè)定方法。按文獻(xiàn)方法進(jìn)行青蒿素測(cè)定，發(fā)現(xiàn)結(jié)果不穩(wěn)定、操作繁瑣。研究表明影響柱前衍生HPLC-UV法測(cè)定青蒿素含量結(jié)果的主要因素是溶解青蒿素標(biāo)準(zhǔn)品（或青蒿提取浸膏）的95％乙醇用量和堿、酸化過(guò)程的堿、酸用量。以此為基礎(chǔ)改進(jìn)建立了新的青蒿素柱前衍生HPLC-UV測(cè)定方法。
　　3、評(píng)價(jià)了黑龍江省野生青蒿資源利用價(jià)值。對(duì)黑龍江省內(nèi)不同地區(qū)野生青蒿中青蒿素含量進(jìn)

4、行測(cè)定表明，青蒿素含量均低于0.1％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于青蒿素含量≥0.5％的藥用標(biāo)準(zhǔn)，即黑龍江省野生青蒿資源無(wú)利用價(jià)值。
　　4、建立了青蒿引種栽培技術(shù)。對(duì)比室內(nèi)和野外育苗結(jié)果及育苗方法表明:黑龍江省引種青蒿，采用溫室育苗，可延長(zhǎng)青蒿的生長(zhǎng)期45 d左右，集成板式紙筒育苗移栽方便、用土量小，成本低。不同地區(qū)引種青蒿相同時(shí)間收獲，育苗和移栽時(shí)間越早青蒿素產(chǎn)量最高。引種的青蒿，營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)可持續(xù)到9月初，生長(zhǎng)期長(zhǎng)近170 d，可獲得巨大藥用部位生

5、物量;8月20日后陸續(xù)轉(zhuǎn)入生殖生長(zhǎng)，本地氣候高溫、光照強(qiáng)，此時(shí)可獲得高含量的青蒿素。即提早育苗移栽，可延長(zhǎng)其生長(zhǎng)時(shí)間，在氣溫較高的月份積累最高的青蒿素含量并達(dá)到大的生物量，從而提高青蒿素產(chǎn)量。
　　5、通過(guò)大田栽培和露天盆栽方法，研究了植物生長(zhǎng)必需的多數(shù)營(yíng)養(yǎng)因子、逆境脅迫、輻射青蒿種子、日光、晝夜溫差、栽培密度、育苗和移栽時(shí)間對(duì)青蒿藥用生物量和青蒿素含量的影響，結(jié)果如下：
　　營(yíng)養(yǎng)元素單因子對(duì)青蒿素產(chǎn)量的影響大小順序?yàn)閺?fù)合肥

6、(NPK)＞K＞Ca＞Fe＞Mg＞B＞P＞ Mn＞Cu＞N＞Mo＞Zn＞ck(對(duì)照)。最大可使青蒿素含量提高對(duì)照的49.3％、青蒿藥用生物量提高對(duì)照的55.4％、青蒿素產(chǎn)量提高對(duì)照的111.8％。
　　植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑單因素對(duì)青蒿素產(chǎn)量影響大小順序?yàn)?GA3＞NAA＞氨基酸微肥＞B9＞KT。最大可使青蒿素含量提高對(duì)照的36.9％、青蒿藥用生物量提高對(duì)照的93.3％、青蒿素產(chǎn)量提高對(duì)照的125.5％。
　　栽培密度大小對(duì)青蒿素含

7、量雖有影響但幅度不大，但種植密度大可提高青蒿素產(chǎn)量（源于生物量產(chǎn)量的貢獻(xiàn)）。
　　大田栽培施肥技術(shù):氮肥720 kg/ha、磷肥1080 kg/ha、鉀肥1080 kg/ha及鈣月巴360kg/ha，赤霉素、萘乙酸及氨基酸微肥噴施濃度分別為40 mg/L、5 mg/L及225倍液。青蒿素含量最高可達(dá)到:1.0484％，最低為:0.5598％。
　　6、引種青蒿中青蒿素含量累積趨勢(shì)與本地野生青蒿一致，但含量高低差異極大，說(shuō)明青