胚胎干細胞分泌生長因子的檢測以及對于創(chuàng)傷愈合作用的初步探討.pdf

1、目的：研究了胚胎干細胞分泌的細胞生長因子對于創(chuàng)傷愈合的影響。 方法：使用間接免疫熒光染色的方法鑒定胚胎干細胞，檢測的指標包括SSEA-1，SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60，TRA-1-81，OCT-4，同時使用免疫組化方法檢測了AKP；使用ELISA法測定胚胎干細胞分泌的四種與創(chuàng)傷愈合相關的細胞生長因子的分泌趨勢、含量以及穩(wěn)定性；采用兩種不同的創(chuàng)傷模型來評價胚胎干細胞分泌的細胞生長因子對于創(chuàng)傷愈合的作用。 第

2、一種采用SD大鼠燙傷模型，使用胚胎干細胞分泌的細胞生長因子噴霧劑治療，使用含硫酸慶大霉素的無菌生理鹽水噴霧劑作為對照組； 第二種采用新西蘭家兔切割創(chuàng)傷模型，使用冰凍干燥法將胚胎干細胞分泌的細胞生長因子濃縮形成粉末作為治療組，使用氨芐青霉素粉末作為對照，兩種模型均通過比較兩組創(chuàng)傷愈合的時間來加以評價。 結果：免疫組化染色結果顯示，測定的細胞表達SSEA-1，SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60，TRA-1-81，O

3、CT-4，AKP，證實其為胚胎干細胞；這些胚胎干細胞能分泌與創(chuàng)傷愈合相關的四種細胞生長因子，且在培養(yǎng)的第5天達到峰值，PDGF、VEGF、EGF、bFGF的峰值分別為：148.9±18.1，198.4±25.2,170.8±30.7，38.2±7.5(pg/ml)，然后降低。生長因子濃度的測定顯示：3批培養(yǎng)液中PDGF、VEGF、EGF、bFGF平均含量依次為225.0±19.9、163.0±10.3、255.0±19.4、47.0±3

4、.7(pg/ml)；穩(wěn)定性檢測結果發(fā)現(xiàn)，30天后，儲存在-20℃、4℃、和25℃條件下的細胞生長因子平均含量分別為：PDGF，207±11.9、160.9±23.0、149.2±41.4；VEGE，146.1±43.5、116.3±20.2、112.5±29.6；EGF，245±21.1、169.9±23.4、161.1±29.5；bFGF，37.0±16.9、27.4±7.0、23.9±6.7(pg/ml).療效顯示，對于SD大鼠燙傷

5、模型，胚胎干細胞分泌的生長因子噴霧劑組的平均愈合時間為27±3天，無菌生理鹽水對照組為25±6天，兩組比較P>0.05，無統(tǒng)計學差異；對于家兔創(chuàng)傷模型，胚胎干細胞分泌生長因子冰凍干燥治療組平均愈合天數(shù)為11±2天，氨芐青霉素對照組為13±1天，兩組比較t<0.05,有統(tǒng)計學差異。 結論：胚胎干細胞分泌的細胞生長因子噴霧劑有促進創(chuàng)傷愈合的趨勢；胚胎干細胞分泌的細胞生長因子冰凍干燥粉經(jīng)實驗證實能促進創(chuàng)傷愈合，這些細胞因子在低溫下能保