滋腎化瘀祛痰湯對多囊卵巢綜合征大鼠胰島素抵抗相關(guān)性影響的研究.pdf

1、目的：
　　探討滋腎化瘀祛痰湯對多囊卵巢綜合征（PCOS）大鼠高胰島素血癥、胰島素抵抗（insulin resistance,IR）相關(guān)因子如：卵巢胰島素受體（insulin receptor,INR）、胰島素樣生長因子-1受體（IGF-1R）表達(dá)的影響，以期從細(xì)胞及分子水平揭示滋腎化瘀祛痰湯的療效及作用機(jī)制。
　　方法：
　　選用體重180~200g（6~7周齡）的SD雌性大鼠，兩周后選擇規(guī)律發(fā)情周期大鼠54只，隨機(jī)

2、分為正常對照組（n=10）和病理模型組（n=44）。應(yīng)用人絨毛膜促性腺激素（HCG）聯(lián)合胰島素(INS)造模法建立 PCOS動物模型。第1~10天每天皮下注射逐漸遞增劑量的INS0.5~6.0IU；第11~22天皮下注射INS6.0IU每天1次和HCG3.0IU每天兩次。造模完成后通過陰道細(xì)胞學(xué)檢查剔除造模不成功的大鼠，將上述病理模型組隨機(jī)分為模型對照組（n=10）、二甲雙胍組（n=10）、滋腎化瘀祛痰湯組（n=10）、益腎導(dǎo)痰調(diào)沖湯組

3、（n=10）。每天灌胃予對應(yīng)劑量的藥物：二甲雙胍組0.16g/kg·d、滋腎化瘀祛痰湯組46.90g/kg·d、益腎導(dǎo)痰調(diào)沖湯組47.92 g/kg·d、正常對照組與模型對照組給予生理鹽水10ml/kg·d，14天后處死。
　　各組于實驗第1天、第23天、第36天測體重；實驗結(jié)束時，心臟取血，放免法測定血清中睪酮(T)、雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、胰島素（INS）的含量；取雙側(cè)卵巢稱重，光鏡觀察卵巢組

4、織形態(tài)學(xué)改變并計算平均卵巢面積(MOP)；應(yīng)用免疫組化法觀察卵巢組織INR和IGF-1R表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.陰道涂片：正常對照組均表現(xiàn)為規(guī)律發(fā)情周期，模型對照組及二甲雙胍組動情周期失去規(guī)律性變化，滋腎化瘀祛痰湯組70％恢復(fù)規(guī)律動情周期，益腎導(dǎo)痰調(diào)沖湯組60%恢復(fù)規(guī)律動情周期。
　　2.大鼠體重：造模后，病理模型組體重較正常對照組明顯增加(P<0.05)；用藥后，兩中藥組均明顯低于模型對照組(P<0.05)，二甲

5、雙胍組與模型對照組間、兩中藥組間均無顯著差異。
　　3.卵巢病理改變及重量、面積：正常對照組卵巢結(jié)構(gòu)完整，無明顯異常；模型對照組卵巢較蒼白，面積增大，見較多囊狀擴(kuò)張卵泡，顆粒細(xì)胞層數(shù)減少、排列稀疏，卵泡膜細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞增生；兩中藥組卵巢色澤紅潤，面積減小，囊狀卵泡減少，顆粒細(xì)胞形態(tài)完整、排列整齊，卵泡膜細(xì)胞層變厚，黃體組織增多；滋腎化瘀祛痰湯組較益腎導(dǎo)痰調(diào)沖湯組改善更明顯。模型對照組卵巢重量和MOP均較正常對照組顯著增加（P<0.

6、01），兩中藥組均較模型對照組顯著降低（P<0.05），二甲雙胍組與模型對照組間、兩中藥組間均無顯著性差異。
　　4.血清激素測定：模型對照組血清T、FSH、LH、INS均較正常對照組明顯增加（P<0.05）；滋腎化瘀祛痰湯組血清T、FSH、LH、INS和二甲雙胍組、益腎導(dǎo)痰調(diào)沖湯組血清T、LH、INS均較模型對照組明顯降低（P<0.05）；各組間血清E2均無顯著性差異。
　　5.INR和IGF-1R的表達(dá)：模型對照組顆粒細(xì)

7、胞IGF-1R表達(dá)較正常對照組明顯增加（P<0.05），兩中藥組IGF-1R表達(dá)較模型對照組明顯降低（P<0.05），二甲雙胍組與模型對照組間、兩中藥組間無顯著性差異。模型對照組INR表達(dá)明顯低于正常對照組（P<0.05），滋腎化瘀祛痰湯組較模型對照組、益腎導(dǎo)痰調(diào)沖組均明顯增高（P<0.05），二甲雙胍組、益腎導(dǎo)痰調(diào)沖湯組與模型對照組間均無顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1.HCG聯(lián)合INS誘導(dǎo)SD成年雌性大鼠PCOS模型卵巢

8、病理改變及血內(nèi)分泌改變與PCOS胰島素抵抗相關(guān)，揭示了多囊卵巢綜合征胰島素抵抗發(fā)生的可能機(jī)制。
　　2．滋腎化瘀祛痰湯可以明顯降低PCOS大鼠卵巢中IGR-1R的表達(dá)，而且可以增加INR的表達(dá)，減輕卵巢多囊樣變，推測其促排卵的機(jī)制可能是通過對卵巢局部過高的胰島素及IGFs的作用，降低PCOS大鼠胰島素及雄激素水平，從而促使卵巢排卵。
　　3.滋腎化瘀祛痰湯對PCOS大鼠有顯著治療作用，其對胰島素抵抗的改善尤為明顯。臨床上PC