耐青霉素肺炎鏈球菌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的:通過對耐青霉素肺炎鏈球菌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究，從蛋白質(zhì)水平上闡述肺炎鏈球菌耐青霉素相關(guān)蛋白的種類及其功能，探索耐青霉素肺炎鏈球菌的機(jī)制。
　　方法:用肉湯稀釋法測定青霉素類抗菌藥物-苯唑西林(oxacillin)對肺炎鏈球菌國際標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC49619的最低抑菌濃度(MIC);采用次抑菌濃度誘導(dǎo)法體外人工誘導(dǎo)耐青霉素肺炎鏈球菌株;雙向電泳分離肺炎鏈球菌國際標(biāo)準(zhǔn)菌株和誘導(dǎo)耐藥株的全菌蛋白質(zhì);Image Master2D Plat

2、inum5.0軟件對電泳圖譜進(jìn)行分析，尋找表達(dá)差異蛋白點(diǎn);對差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜分析;初步分析差異蛋白點(diǎn)的功能。
　　結(jié)果:(1)成功誘導(dǎo)耐青霉素肺炎鏈球菌。肺炎鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC49619 MIC為0.06μg/m1，誘導(dǎo)耐藥后MIC為3.84μg/ml，依據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室國家標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)關(guān)于肺炎鏈球菌對青霉素的MIC結(jié)果的判定為耐藥;(2)對肺炎鏈球菌的標(biāo)準(zhǔn)株和耐藥株的全菌蛋白進(jìn)行差異蛋白的分析后，發(fā)現(xiàn)并鑒定了

3、差異蛋白點(diǎn)10個(gè)。
　　結(jié)論:(1)成功建立肺炎鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株和耐藥菌株的全菌蛋白雙向電泳圖譜，分別分離出約320，350個(gè)蛋白點(diǎn);(2)差異蛋白分析:耐藥株較之標(biāo)準(zhǔn)株分子伴侶(chaperonin GroES)、脂蛋白(lipoprotein)、果糖二磷酸醛縮酶(fructose-bi sphosphate aldolase)、α-烯醇化酶(alpha-enolase)表達(dá)量下調(diào)，ABC轉(zhuǎn)運(yùn)器(ABC transporter)、