金雀異黃素對缺氧下RPE細胞增殖的抑制作用及機理探討.pdf

1、以往的研究證實金雀異黃素能抑制視網(wǎng)膜色素上皮(retinalpigment epithelium，RPE)細胞的增殖，然而缺氧條件下金雀異黃素(genistein，Gen)對培養(yǎng)視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigmentepithelium，RPE)細胞生長的影響以及可能作用機制還不明確。本研究以常氧條件為對照，建立人RPE細胞的缺氧模型，Gen分別以25、50、100uM(組)的藥物濃度作用于細胞；甲基噻唑基四唑(methylth

2、iazolyltetrazolium，MTT)測定法測定2 4小時細胞活力(以吸光度A值表示)；流式細胞儀檢測各細胞周期細胞生長情況；免疫印記檢測增殖細胞核抗原(PCNA)、細胞周期蛋白D 1(CyclinDl)、細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 (extracellular signal-regulatedkinases，ERKs)、大分子MAPK (big mitogen-activated proteinkinases-1，BMK1))、c-J

3、un氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)以及p38MAPK的表達。結果表明與對照組比，缺氧引起細胞活力，S期細胞數(shù)，PCNA、CyclinD1蛋白的表達增加，細胞表現(xiàn)為增殖。加Gen組細胞活力下降，細胞在G1期和S期被阻滯，PCNA、CyclinD1蛋白表達下降，細胞增殖被抑制。隨著Gen濃度的增高，活力逐漸降低，PCNA和CyclinD1蛋白表達逐漸下降。缺氧引起p-ERK1/2蛋白表達下降，Gen組